Para la aplicación de los productos se utilizó una mochila de espaldas, manual, con una capacidad de 16 L y una descarga de 300 L ha^-1, realizando los ajustes necesarios para, lograr la dosis requerida.

Las evaluaciones se iniciaron el 19 de diciembre del 2015, tres semanas después de la primera aplicación (momento en que aparecieron en el ensayo de campo los primeros organismos) y concluyeron el 23 de enero del 2016, realizándose de la siguiente forma: se seleccionaron diez plantas al azar de los dos surcos centrales de las parcelas, se observó un foliolo del nivel central de la planta. En cada foliolo con la ayuda de una lupa, aumento 10X y de forma manual se contó el número de ninfas y adultos de thrips y salta hojas, el número de ninfas de mosca blanca y el promedio de los 10 foliolos. Se expresó como número de insectos por foliolo (inserto foliolo^-1).

Con los datos de las seis evaluaciones se realizó un gráfico de líneas para analizar el comportamiento de las poblaciones de cada uno de los organismos nocivos evaluados, utilizando Microsoft Excel 2010. Con los datos de las evaluaciones primera, segunda y sexta evaluación y con el promedio de los datos de las seis evaluaciones, se realizaron análisis de varianza de clasificación doble y las medias de los tratamientos fueron comparadas mediante la Prueba de Tukey al 95 % de probabilidad ¹². Antes del análisis, los datos de población fueron transformados, según la expresión (X+1)^½.

La cosecha se realizó cuando cada una de las parcelas llegó al grado de madurez de cosecha (90 % de defoliación de la planta y 20 % de contenido de humedad de los granos). Las dos primeras parcelas con tratamientos de L. lecanii y Azufre se cosecharon a los 87 días, después de germinadas las parcelas, los tratamientos con M. anisopliae y T. harzianum a los 94 días, después de la siembra y las parcelas con el control fueron recolectadas a los 100 días después de la siembra. En el proceso de la cosecha se evaluaron los siguientes indicadores:

El número de legumbre por plantas se evaluó después de la cosecha y para esto se seleccionaron diez plantas por parcela al azar y de las hileras centrales, se contó y se promedió el número de legumbres. El número de granos por legumbre se determinó tomando las legumbres de las diez plantas seleccionadas anteriormente, se extrajeron los granos, se contó y se obtuvo el promedio para cada réplica. Para el rendimiento se cosechó un metro lineal (0,70 m²) de cada parcela, se secaron los granos, se determinó su masa y se estimó el mismo en t ha^-1 al 12 % de humedad. Con los datos obtenidos para cada uno de las variables evaluadas, se realizaron análisis de varianza de clasificación doble y las medias se compararon mediante la Prueba de Tukey al 95 % ¹².

En la Figura 1 se muestran los resultados de las fluctuaciones poblacionales de T. palmi durante el período evaluado. En los tratamientos con hongos se puede apreciar un menor número de insectos por foliolo que en el control, destacándose la efectividad de los hongos M. anisopliae y L. lecanii, teniendo resultados cercanos al Azufre. Los tratamientos con T. harzianum y el control presentaron mayor población de insectos. foliolo^-1, durante el experimento se desarrolló un período de intensas lluvias.

Algunos autores ^5-13 plantean que L. lecanii y M. anisopliae son eficientes como agentes de control biológico y compatibles entre ellos. Tratamientos con M. anisopliae pueden proteger a las raíces de los cultivos de diversos insectos y de algunos patógenos.

Los análisis estadísticos realizados mostraron diferencias altamente significativas; los tratamientos con Metarhizium y Lecanicillium mantuvieron un mejor comportamiento con respecto a los demás hongos, con diferencias significativas entre ellos al evaluar la población de ninfas y adultos de T. palmi, como puede observarse en la Tabla 2.

En la primera evaluación se pude observar que los tratamientos de Lecanicillium y Metarhizium resultaron ser los de mayor efecto sobre las poblaciones de T. palmi, sin diferencias significativas entre ellos.

Por otra parte, en la cuarta evaluación los tratamientos de Lecanicillium, Metarhizium y Azufre mostraron el menor número de insectos por foliolos con diferencias significativas con respecto al control.

En la sexta evaluación, se destaca Metarhizium como el mejor tratamiento, con diferencias significativas, respecto al resto; por su parte, Lecanicillium mantuvo un efecto positivo sobre las poblaciones de insectos, con diferencias significativas en relación con el azufre, mientras que Trichoderma y el control no presentan diferencias significativas entre ellos.

Las aplicaciones de Metarhizium y L. lecanii en frijol han sido dirigidas a organismos nocivos, como T. palmi, con buenos resultados, tanto solo, como combinado con plaguicidas químicos, con los cuales pueden ser compatibles ^14,15.

Diferentes autores han enfatizado en la importancia de esta especie como agente de control biológico de saltamontes en diversas regiones del mundo. En el estado de Chihuahua, México, se ha informado la obtención de aislamientos autóctonos de M. anisopliae, con potencialidad como agentes de control biológico de Brachystola magna Girard (Orthoptera:Romaleidae), una importante plaga del frijol (Phaseolus vulgaris L.) y otros cultivos ^16,17.

En la Figura 2 se muestra el efecto de las aplicaciones de los tres hongos benéficos sobre la población de ninfas y adultos de E. kraemeri en frijol, en condiciones de campo. Se demuestra que la aplicación de los tratamientos influyeron positivamente en la inhibición de las ninfas y adultos, con respecto al control, resaltando los tratamientos de M. anisopliae y L. lecanii, los cuales a los 73 días lograron inhibir las poblaciones de insectos, mientras que el Azufre y el control mantuvieron altas las poblaciones de esta especie.

Lo expuesto anteriormente coincide con lo planteado por diferentes autores, quienes consideran a M. anisopliae y L. lecanii como patógenos fúngicos que se encuentran en muchos ecosistemas y son utilizados en el control biológico contra insectos ¹⁸.

Autores reportan el uso de especies del género Trichoderma con éxito para el control de insectos en cultivos de frijol, pepino, tomate. Planteando también que este género ayuda a las plantas a la absorción de nutrientes, aumentan las raíces y dispara el crecimiento ¹⁹.

El análisis estadístico realizado con los datos de 1ra., 4ta. y 6ta., independiente, y el promedio de las seis evaluaciones, mostró que existen diferencias altamente significativas entre los tratamientos. Como se puede apreciar en la Tabla 3, en la primera evaluación, realizada a los 39 días, los tratamientos con Azufre y Trichoderma resultaron ser los menores inhibidores con un comportamiento similar al control, mientras que Metarhizium resultó ser el mejor inhibidor de las ninfas y los adultos de E. kraemeri.

Por otra parte, la 4ta. y 6ta., independiente y el promedio de las seis evaluaciones, mostró un comportamiento similar de los tratamientos, destacándose Lecanicillium y Metarhizium con efectos positivos sobre la reducción de las poblaciones de insectos sin diferencias significativas entre sí; mientras que el control y el tratamiento con Azufre, aún cuando no presentaron diferencias significativas entre sí, inhibieron en menor medida el crecimiento de ninfas y adultos de E. kraemeri en el cultivo del frijol común.

M.anisopliae ha sido recomendado contra una gran diversidad de insectos fitófagos, de diferentes órdenes y familias, así como de ácaros, en muchos cultivos. Investigaciones realizadas aseguran que el trabajo con estos hongos conducen a mínimos riesgos para el hombre, los vertebrados y el medio ambiente ¹⁶.

En la Figura 3 se muestra el efecto de las aplicaciones de los tres hongos benéficos sobre la población de ninfas de B. tabaci en frijol, en condiciones de campo, en la cual se aprecia que la aplicación de los mismos influyeron positivamente en la inhibición de las ninfas con respecto al control, destacándose L. lecanii como el mejor tratamiento, logrando, al cabo de los 73 días, la inhibición total de las ninfas de B. tabaci en el frijol. Sin embargo, el tratamiento donde se empleó el Azufre, disminuyó las poblaciones en menor cuantía que el resto de los tratamientos donde se emplearon los hongos.

El análisis estadístico realizado con los datos de 1ra., 4ta. y 6ta., independiente y el promedio de las seis evaluaciones, mostró que existen diferencias altamente significativas entre los tratamientos. Como se puede apreciar en la la Tabla 4 desde la primera evaluación, a los 39 días Lecanicillium redujo la población de ninfas de B. tabaci; mientras que el resto de los tratamientos no difirieron del control.

Por otra parte, a partir de la cuarta evaluación, el mejor inhibidor de la poblacion de insectos resultó ser Lecanicillium, con diferencias significativas respecto al resto de los tratamientos y al control; mientras que el tratamiento con Trichoderma y Azufre, inhibieron, en menor medida, el crecimiento de ninfas y adultos de B. tabaco, en el cultivo del frijol común, aún cuando presentaron mejores resultados que el control.

Lo anterior demuestra que, aunque las tres especies fúngicas ejercen cierto grado de control sobre las poblaciones de ninfas de B. tabaci, hay diferencias entre ellas, destacándose como el más efectivo el entomófago L. lecanii, que fue capaz de inhibir en mayor proporción de dichas poblaciones.

Diferentes autores han indicado que L. lecanii es un agente de control biológico ampliamente utilizado por ser un enemigo natural de importantes plagas de insectos y patógenos en los cultivos. Por otra parte se ha demostrado el efecto entomófago de especies del género Trichoderma sobre diferentes insectos como es el caso de mosca de la raíz de la col, Delia radicum L. (Diptera: Anthomyiidae). Mientras que otros autores evaluaron la patogenicidad de T. harzianum sobre ninfas y adultos de B. tabaci, resultando efectivo su control ^8,20,21.

Por su parte, el azufre juega un papel importante en los mecanismos de defensa de las plantas contra plagas y enfermedades, aplicado de forma foliar es absorbido y metabolizado, actuando contra ácaros, trips y mosca blanca ²²

Los resultados obtenidos para los componentes evaluados y el rendimiento estimado se presentan en la Tabla 5. El análisis estadístico realizado mostró diferencias altamente significativas entre los tratamientos.

En cuanto al componente legumbres por planta se obtuvo que todas las variantes difieren estadísticamente entre ellas, con el mayor valor en el caso de los tratamientos con Azufre, seguido de Lecanicillium. En el caso de los granos/legumbre no resultó igual, pues, aunque se mantuvo en el mismo orden entre esos últimos tratamientos, resultaron similares estadísticamente los valores correspondientes a los dos restantes hongos. El ordenamiento en el componente masa de 100 granos fue similar al del número de legumbres por planta. También se obtuvo una tendencia similar en las distintas variables en el caso del rendimiento estimado.

En cuanto a este indicador, se destaca que en todas las variantes, incluyendo el control, se obtuvieron valores superiores a 1 t ha^-1. Los tratamientos se comportaron en orden decreciente de la siguiente forma: Azufre, L. lecanii, T. harzianum, M. anisopliae y control, con valores de 1,56, 1,47, 1,28, 1,21 y 1,10 t ha^-1, respectivamente.

A pesar de las condiciones climáticas no favorables al cultivo, con lluvias no usuales, así como temperaturas y humedad relativa algo superiores a lo normal para el periodo, los tratamientos alcanzaron buenos rendimientos, puesto que esta variedad, en condiciones óptimas, debe tener rendimientos promedio de 2,5 a 3 t ha^{-1 (23}.

Por otro lado, debe destacarse que los resultados aquí obtenidos superan el rendimiento promedio informado para Cuba en el año 2016, de 1,11 t ha^-1 y para el mundo, en ese mismo año, de 0,91 t ha^-1(2.

Los resultados logrados permiten afirmar que las aplicaciones semanales de estos hongos y el azufre son muy beneficiosas para el desarrollo productivo de este cultivo, lo cual corrobora lo señalado por autores quienes aseguraron que las aplicaciones semanales de T. harzianum producen efectos positivos sobre el comportamiento agroproductivo en el cultivo del frijol, teniendo resultados de masa de cien semillas, número de legumbres por planta, número de granos por legumbre y rendimientos superiores a la media nacional ²⁴.

Investigaciones recientes exponen que M. anisopliae estimula el crecimiento de la planta y tienen actividad endofítica. Además indicaron que el efecto del M. anisopliae en el cultivo del frijol estimula el crecimiento tanto de la raíz como de la parte aérea de la planta y que este hongo produce buen efecto in vitro como in vivo sobre Fusarium en el cultivo del frijol; tanto los filtrados libres de células como conidios de este provocan una estabilización en el suelo por lo que se sugiere su uso en contra de algunos patógenos vegetales en la rizosfera ^16-25.

Entre los principales beneficios de Trichoderma spp. se puede mencionar que ofrece un control eficaz en el control de insectos y de enfermedades de las plantas y estimulan su crecimiento. Además, preserva el ambiente al disminuir el uso de fungicidas. También, al remplazar los agroquímicos sintéticos por estos organismos benéficos, los productores ahorran los costos de producción ²⁶.

Diferentes autores han evaluado los beneficios del azufre sobre el rendimiento en el cultivo del frijol, obteniendo cuantiosos resultado, puesto que forma parte en los procesos de desarrollo de las plantas por ser un nutriente considerado dentro de los macroelementos requerido por los cultivos para su producción ²⁷.

For the application of the products, a backpack, manual, with a capacity of 16 L and a discharge of 300 L ha^-1 was used, making the necessary adjustments to achieve the required dose.

The evaluations began on December 19^th, 2015, three weeks after the first application (when the first organisms appeared in the field trial) and concluded on January 23, 2016, being carried out as follows: ten were selected random plants of the two central furrows of the plots, a leaflet of the central level of the plant was observed. In each leaflet with the help of a magnifying glass, 10X magnification and manually counted the number of thrips nymphs and adults and jumps leaves, the number of whitefly nymphs and the average of the 10 leaflets. It was expressed as the number of insects per leaflet (insert leaflet^-1).

With the data of the six evaluations, a line graph was made to analyze the behavior of the populations of each of the harmful organisms evaluated, using Microsoft Excel 2010. With the data of the first, second and sixth evaluation and with the average from the data of the six evaluations, double classification variance analyzes were performed and the treatment means were compared using the Tukey Test at 95 % probability ¹². Before the analysis, the population data were transformed, according to the expression (X+1)^½.

The harvest was carried out when each of the plots reached the level of harvest maturity (90 % defoliation of the plant and 20 % moisture content of the grains). The first two plots with treatments of L. lecanii and Sulfur were harvested at 87 days, after germinated plots, treatments with M. anisopliae and T. harzianum at 94 days, after sowing and control plots they were collected 100 days after planting. In the harvest process the following indicators were evaluated:

The number of legumes per plants was evaluated after harvesting and for this, ten plants were selected per random plot and from the central rows, the number of legumes was counted and averaged. The number of grains per leg was determined by taking the legumes of the ten previously selected plants, the grains were extracted, counted and the average obtained for each replica. For the yield, a linear meter (0.70 m²) of each plot was harvested, the grains were dried, their mass was determined and it was estimated in t ha^-1 at 12 % humidity. With the data obtained for each of the variables evaluated, double classification variance analyzes were performed and the means were compared using the 95 % Tukey Test ¹².

The results of the population fluctuations of T. palmi during the period evaluated are shown in Figure 1. In fungal treatments, a lower number of insects per leaflet can be seen than in the control, highlighting the effectiveness of M. anisopliae and L. lecanii fungi, with results close to sulfur. The treatments with T. harzianum and the control presented a greater population of insects.leaflet^-1, during the experiment a period of heavy rains developed.

Some authors ^5,13 state that L. lecanii and M. anisopliae are efficient as biological control agents and compatible with each other. Treatments with M. anisopliae can protect the roots of crops of various insects and some pathogens.

The statistical analyzes performed showed highly significant differences; the treatments with Metarhizium and Lecanicillium maintained a better behavior with respect to the other fungi, with significant differences between them when evaluating the population of nymphs and adults of T. palmi, as can be seen in Table 2.

In the first evaluation it was observed that the treatments of Lecanicillium and Metarhizium were the ones with the greatest effect on T. palmi populations, without significant differences between them.

On the other hand, in the fourth evaluation the treatments of Lecanicillium, Metarhizium and Sulfur showed the least number of insects per leaflets with significant differences with respect to the control.

In the sixth evaluation, Metarhizium stands out as the best treatment, with significant differences, with respect to the rest; On the other hand, Lecanicillium maintained a positive effect on insect populations, with significant differences in relation to sulfur, while Trichoderma and the control did not show significant differences between them.

The applications of Metarhizium and L. lecanii in beans have been directed to harmful organisms, such as T. palmi, with good results, both alone, and in combination with chemical pesticides, with which they can be compatible ^14,15.

Different authors have emphasized the importance of this species as a biological control agent for grasshoppers in various regions of the world. In the state of Chihuahua, Mexico, it has been reported to obtain native isolates of M. anisopliae, with potential as biological control agents of Brachystola magna Girard (Orthoptera: Romaleidae), an important bean pest (Phaseolus vulgaris L.) and other crops ^16,17.

Figure 2 shows the effect of the applications of the three beneficial fungi on the population of nymphs and adults of E. kraemeri in beans, under field conditions. It is shown that the application of the treatments positively influenced the inhibition of nymphs and adults, with respect to the control, highlighting the treatments of M. anisopliae and L. lecanii, which at 73 days managed to inhibit insect populations, while that sulfur and control kept populations of this species high.

The foregoing coincides with that raised by different authors, who consider M. anisopliae and L. lecanii as fungal pathogens that are found in many ecosystems and are used in biological control against insects ¹⁸.

Authors report the use of Trichoderma species successfully for insect control in bean, cucumber, tomato crops. Also suggesting that this genus helps plants to absorb nutrients, increase roots and triggers growth ¹⁹.

The statistical analysis performed with the data of 1^st, 4^th and 6^th, independent, and the average of the six evaluations, showed that there are highly significant differences between treatments. As can be seen in Table 3, in the first evaluation, carried out at 39 days, the treatments with Sulfur and Trichoderma turned out to be the smallest inhibitors with a behavior similar to the control, while Metarhizium proved to be the best inhibitor of nymphs and the adults of E. kraemeri.

On the other hand, the 4th. and 6th, independent and the average of the six evaluations, showed a similar treatment behavior, highlighting Lecanicillium and Metarhizium with positive effects on the reduction of insect populations without significant differences between them; while control and treatment with Sulfur, even when they did not show significant differences between them, inhibited the growth of nymphs and adults of E. kraemeri to a lesser extent in the cultivation of common beans.

M. anisopliae has been recommended against a great diversity of phytophagous insects, of different orders and families, as well as of mites, in many crops. Research carried out ensures that working with these fungi leads to minimal risks for humans, vertebrates and the environment ¹⁶.

Figure 3 shows the effect of the applications of the three beneficial fungi on the population of nymphs of B. tabaci in beans, under field conditions, in which it can be seen that their application positively influenced the inhibition of nymphs with respect to control, highlighting L. lecanii as the best treatment, achieving, after 73 days, the total inhibition of nymphs of B. tabaci in beans. However, the treatment where sulfur was used, decreased populations to a lesser extent than the rest of the treatments where fungi were used.

The statistical analysis performed with the data of 1st, 4^th and 6^th, independent and the average of the six evaluations, showed that there are highly significant differences between treatments. As can be seen in Table 4 from the first evaluation, at 39 days Lecanicillium reduced the population of nymphs of B. tabaci; while the rest of the treatments did not differ from the control.

On the other hand, from the fourth evaluation, the best inhibitor of the insect population was Lecanicillium, with significant differences with respect to the rest of the treatments and control; while the treatment with Trichoderma and Sulfur, inhibited, to a lesser extent, the growth of nymphs and adults of B. tobacco, in the cultivation of common beans, even when they presented better results than the control.

This demonstrates that, although the three fungal species exert a certain degree of control over the populations of nymphs of B. tabaci, there are differences between them, standing out as the most effective entomophagus L. lecanii, which was able to inhibit in greater proportion of these populations.

Different authors have indicated that L. lecanii is a biological control agent widely used as a natural enemy of important insect and pathogen pests in crops. On the other hand, the entomophage effect of species of the genus Trichoderma on different insects has been demonstrated, such as the cabbage root fly, Delia radicum L. (Diptera: Anthomyiidae). While other authors evaluated the pathogenicity of T. harzianum on nymphs and adults of B. tabaci, its control being effective ^20-22.

On the other hand, sulfur plays an important role in the defense mechanisms of plants against pests and diseases, applied in a foliar way is absorbed and metabolized, acting against mites, thrips and whitefly ²³.

The results obtained for the components evaluated and the estimated yield are presented in Table 5. The statistical analysis performed showed highly significant differences between treatments.

As for the legumes component per plant, it was obtained that all variants differ statistically between them, with the greatest value in the case of sulfur treatments, followed by Lecanicillium. In the case of grains/legumes it was not the same, because, although it remained in the same order between these last treatments, the values corresponding to the two remaining fungi were statistically similar. The arrangement in the mass component of 100 grains was similar to the number of legumes per plant. A similar trend was also obtained in the different variables in the case of the estimated yield.

Regarding this indicator, it is noted that in all variants, including the control, values greater than 1 t ha^-1 were obtained. The treatments behaved in descending order as follows: Sulfur, L. lecanii, T. harzianum, M. anisopliae and control, with values of 1.56, 1.47, 1.28, 1.21 and 1.10 t ha^-1, respectively.

Despite the climatic conditions not favorable to the crop, with unusual rains, as well as temperatures and relative humidity somewhat higher than normal for the period, the treatments reached good yields, since this variety, in optimal conditions, should have average yields from 2.5 to 3 t ha^{-1 (24}.

On the other hand, it should be noted that the results obtained here exceed the average yield reported for Cuba in 2016, of 1.11 t ha^-1 and for the world, in that same year, of 0.91 t ha^{-1 (2}.

The results achieved allow us to affirm that the weekly applications of these fungi and sulfur are very beneficial for the productive development of this crop, which corroborates what was stated by authors who assured that the weekly applications of T. harzianum produce positive effects on the agroproductive behavior in the cultivation of beans, having results of mass of one hundred seeds, number of legumes per plant, number of grains per legume and yields above the national average ²⁵.

Recent research shows that M. anisopliae stimulates plant growth and has endophytic activity. They also indicated that the effect of M. anisopliae on bean cultivation stimulates the growth of both the root and the aerial part of the plant and that this fungus produces good effect in vitro and in vivo on Fusarium in bean cultivation; both cell-free filtration and conidia of this cause stabilization in the soil, so its use is suggested against some plant pathogens in the rhizosphere ^16,25.

Among the main benefits of Trichoderma spp. It can be mentioned that it offers effective control in the control of insects and plant diseases and stimulate their growth. In addition, it preserves the environment by decreasing the use of fungicides. Also, by replacing synthetic agrochemicals with these beneficial organisms, producers save production costs ²⁶.

Different authors have evaluated the benefits of sulfur on the yield in bean cultivation, obtaining numerous results, since it is part of the processes of plant development because it is a nutrient considered within the macroelements required by crops for their production ²⁷.