Cultivos Tropicales Vol. 43, No. 2, abril-junio 2022, ISSN: 1819-4087
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Artículo original

Bioestimulantes promueven la germinación de semillas de arroz (Oryza sativa L.) en medio salino

 

iDGeydi Pérez-Domínguez*✉:geydi@inca.edu.cu

iDIndira López-Padrón

iDLisbel Martínez-González

iDYanelis Reyes-Guerrero

iDMiriam de la C. Núñez-Vázquez


Instituto Nacional de Ciencias Agrícolas (INCA), carretera San José-Tapaste, km 3½, Gaveta Postal 1, San José de las Lajas, Mayabeque, Cuba. CP 32 700.

 

*Autor para correspondencia: geydi@inca.edu.cu

Resumen

El arroz es uno de los cereales más importantes y alimenta a más del 50 % de la población mundial. Su producción se ve afectada por diferentes factores, entre ellos, la salinización de los suelos. Por este motivo, se hace necesario utilizar estrategias que reduzcan el daño que provoca la salinidad en el establecimiento, crecimiento y desarrollo de estas plantas, siendo una de ellas el empleo de productos bioactivos amigables con el medio ambiente. El objetivo del presente trabajo fue determinar si el tratamiento a las semillas de arroz cultivar INCA LP-7 con Pectimorf® o con un extracto acuoso de Sargassum fluitans, es capaz de estimular la germinación de las mismas en medio salino. Para dar cumplimiento a este objetivo se ejecutaron dos experimentos; en el primero se sumergieron las semillas, durante 24 horas, en soluciones de diferentes concentraciones de Pectimorf® (10, 20 y 40 mg L-1) y en el segundo, en diferentes concentraciones del extracto de sargazo (0,5 %, 1 %, 1,5 %, 3,5 % y 5 %). En ambos experimentos se pusieron a germinar las semillas por siete días y se evaluó la dinámica de germinación, así como el porcentaje final de germinación, la masa seca de las plántulas y el índice de vigor. Los resultados demostraron que la aplicación de 10 y 40 mg L-1 de Pectimorf® estimularon significativamente el porcentaje final de germinación y el índice de vigor en medio salino, mientras que el extracto de sargazo incrementó, tanto la masa seca, como el índice de vigor en todas las concentraciones estudiadas.

Palabras clave: 
Oryza sativa, oligogalacturónido, Sargassum fluitans, semillas, salinidad

Recibido: 05/11/2020; Aceptado: 18/3/2021

CONTENIDO

Introducción

 

El arroz (Oryza sativa L.) es una monocotiledónea perteneciente a la familia Poaceae. Es uno de los cereales de mayor producción a nivel mundial y constituye una de las bases de la alimentación humana (11. John A, Fielding M. Rice production constraints and ‘new’challenges for South Asian smallholders: insights into de facto research priorities. Agriculture & Food Security [Internet]. 2014;3(1):1-16. Available from: https://agricultureandfoodsecurity.biomedcentral.com/articles/10.1186/2048-7010-3-18 ,22. Onyango AO. Exploring options for improving rice production to reduce hunger and poverty in Kenya. World Environment [Internet]. 2014;4(4):172-9. Available from: http://article.sapub.org/10.5923.j.env.20140404.03.html ). Sus rendimientos futuros se ponen en peligro debido a su alta sensibilidad a la sal, que se prevé que aumentará con el cambio climático global (33. Radanielson AM, Angeles O, Li T, Ismail AM, Gaydon DS. Describing the physiological responses of different rice genotypes to salt stress using sigmoid and piecewise linear functions. Field Crops Research [Internet]. 2018;220:46-56. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0378429017307578 ). Es un cultivo sensible a la sal y ante condiciones de estrés salino se manifiesta una afectación en la germinación de las semillas (44. Ghaffari A, Gharechahi J, Nakhoda B, Salekdeh GH. Physiology and proteome responses of two contrasting rice mutants and their wild type parent under salt stress conditions at the vegetative stage. Journal of Plant Physiology [Internet]. 2014;171(1):31-44. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0378429017307578 ,55. Nath M, Yadav S, Sahoo RK, Passricha N, Tuteja R, Tuteja N. PDH45 transgenic rice maintain cell viability through lower accumulation of Na+, ROS and calcium homeostasis in roots under salinity stress. Journal of plant physiology [Internet]. 2016;191:1-11. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0176161715002631 ).

La salinidad puede afectar la germinación de las semillas de dos formas: primeramente crea un estrés osmótico y posteriormente se evidencia la toxicidad de los iones de sodio y cloruro (66. Masondo NA, Kulkarni MG, Finnie JF, Van Staden J. Influence of biostimulants-seed-priming on Ceratotheca triloba germination and seedling growth under low temperatures, low osmotic potential and salinity stress. Ecotoxicology and environmental safety [Internet]. 2018;147:43-8. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0147651317305134 ,77. Hussain S, ZHANG J, Zhong C, ZHU L, CAO X, YU S, et al. Effects of salt stress on rice growth, development characteristics, and the regulating ways: A review. Journal of integrative agriculture [Internet]. 2017;16(11):2357-74. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2095311916616088 ). Las semillas son particularmente vulnerables a la salinidad porque, en esta etapa, aún no han desarrollado los mecanismos fisiológicos para tolerar el aumento de las concentraciones de sales en el medio (77. Hussain S, ZHANG J, Zhong C, ZHU L, CAO X, YU S, et al. Effects of salt stress on rice growth, development characteristics, and the regulating ways: A review. Journal of integrative agriculture [Internet]. 2017;16(11):2357-74. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2095311916616088 ).

Una de las estrategias que pudiera utilizarse para contrarrestar el efecto de la salinidad, además de la utilización de cultivares tolerantes, es la aplicación de diferentes productos ecológicamente inocuos como pueden ser los bioestimulantes y los reguladores del crecimiento (88. Núñez-Vázquez M, Martínez-González L, Reyes-Guerrero Y. Oligogalacturónidos estimulan el crecimiento de plántulas de arroz cultivadas en medio salino. Cultivos Tropicales [Internet]. 2018;39(2):96-100. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S025859362018000200013&script=sci_arttext&tlng=en ).

El grupo de Productos Bioactivos del Instituto Nacional de Ciencias Agrícolas ha desarrollado una mezcla de oligogalacturónidos denominada comercialmente como Pectimorf®. Este producto puede activar mecanismos de defensa y disminuir o atenuar el estrés ambiental en las plantas (99. Falcón Rodríguez AB, Costales Mené D, González-Peña Fundora D, Nápoles García MC. Nuevos productos naturales para la agricultura: las oligosacarinas. Cultivos Tropicales [Internet]. 2015;36:111-29. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0258-59362015000500010 ,1010. Acosta DL, Menéndez DC, Rodríguez AF. Los oligogalacturónidos en el crecimiento y desarrollo de las plantas. Cultivos Tropicales [Internet]. 2018;39(2):127-34. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0258-59362018000200020&script=sci_arttext&tlng=pt ); además, también estimula el enraizamiento, crecimiento y diferenciación celular de diferentes especies vegetales.

El uso de las algas marinas como bioestimulantes es un sector en crecimiento en varias partes del mundo. Una de las razones que hacen a las algas marinas buenas candidatas para la producción de bioestimulantes vegetales es la presencia de una extensa gama de sustancias bioactivas que pueden favorecer el crecimiento vegetal, entre ellas: fitohormonas, macro y micronutrientes, aminoácidos y vitaminas. Además de estos compuestos, las algas poseen otros metabolitos únicos como los polisacáridos sulfatados y algunos polifenoles que, según otras investigaciones mejoran la resistencia al estrés (1111. González-Giro Z, Batista-Corbal PL. Evaluación de la fitotoxicidad de un extracto acuoso del alga Padina gymnospora (Kützing) sobre semillas de Lactuca sativa L. Biotecnología Vegetal [Internet]. 2018;18(3). Available from: https://revista.ibp.co.cu/index.php/BV/article/view/592 ).

Dentro de todas las algas marinas los extractos de algas pardas y en especial, los extractos de sargazos han cobrado especial importancia, siendo utilizados como biofertilizantes o estimulantes naturales del crecimiento de las plantas. Varios trabajos anteriores han constatado los efectos estimuladores de estos extractos en la germinación de semillas (1212. Mahmoud SH, Salama DM, El-Tanahy AM, Abd El-Samad EH. Utilization of seaweed (Sargassum vulgare) extract to enhance growth, yield and nutritional quality of red radish plants. Annals of Agricultural Sciences [Internet]. 2019;64(2):167-75. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0570178319300272 ,1313. Fatimah S, Aliman H, Daud N. Phytochemical screening of Sargassum sp and in vitro seed germination test. Indonesian Journal of Science and Technology [Internet]. 2019;4(1):48-54. Available from: https://pdfs.semanticscholar.org/953b/0ebe37e581af32a1df44b0e0a26812dc862b.pdf ).

Por todo lo anterior, el objetivo de este trabajo fue determinar si el tratamiento a las semillas de arroz cultivar INCA LP-7 con Pectimorf® o con un extracto acuoso de Sargassum fluitans es capaz de estimular la germinación de las mismas en medio salino.

Materiales y métodos

 

Para dar cumplimiento al objetivo de este trabajo se ejecutaron dos experimentos en el Departamento de Fisiología y Bioquímica Vegetal del Instituto Nacional de Ciencias Agrícolas, ubicado en el municipio San José de las Lajas, provincia Mayabeque.

En ambos experimentos se utilizaron semillas de arroz (Oryza sativa L.) cultivar INCA LP-7, las cuales fueron embebidas durante 24 horas en diferentes concentraciones de los bioestimulantes. Una vez culminada la imbibición, las semillas se colocaron en placas Petri (20 semillas por placa y cuatro placas por tratamiento) y se dividieron en dos grupos. A un grupo se le adicionaron 15 mL de agua destilada, mientras que al segundo se le adicionó igual cantidad de solución de NaCl 100 mmol L-1. Las placas se colocaron en la oscuridad en una cámara de crecimiento a 28-30 oC durante siete días. El número de semillas germinadas se contabilizó en cada placa a las 24, 48, 72, 96 y 168 horas, las semillas se consideraron germinadas cuando su radícula emergió. Al final del experimento, o sea, a los siete días, se tomaron cinco muestras de cinco plántulas por tratamiento para determinar la masa seca de las plántulas, para ello las plántulas se colocaron en una estufa a 70 oC hasta masa constante. Con los datos obtenidos se calcularon los siguientes indicadores: índice y tasa de germinación, porcentaje final de germinación, así como índice de vigor, para lo cual se utilizaron las siguientes ecuaciones:

Índice de germinación

( G I )   =   Σ   ( G t / T t )
 

donde:

Gt es el número de semillas germinadas en el día.

t y Tt es el número de días desde el comienzo de la prueba de germinación.

Tasa de germinación

( G R )   =   Σ N i   /   Σ T i   N i
 

donde:

Ni es el número de semillas recién germinadas en el momento Ti.

Porcentaje final de germinación

( G   % )   =   ( G f / N )   100
 

donde:

Gf es el número total de semillas germinadas al final de la prueba.

N es el número total de semillas utilizadas en la prueba.

Índice de vigor

( V I )   =   S D W   G   %
 

donde:

SDW es la masa seca de la plántula al final de la prueba

G % es el porcentaje final de germinación (1414. Moeinzadeh A, Sharif-Zadeh F, Ahmadzadeh M, Tajabadi Fh. Biopriming of Sunflower (Helianthus annuus L.) Seed with Pseudomonas fluorescens for Improvement of Seed Invigoration and Seedling Growth. Australian Journal of Crop Science [Internet]. 2010;4(7):564-70. Available from: https://search.informit.org/doi/abs/10.3316/informit.536835516534021 ).

En el primer experimento, se utilizaron varias concentraciones (10, 20 y 40 mg L-1) de la mezcla de oligogalacturónidos, conocida como Pectimorf® (Pm), obtenida en el INCA. En el segundo, se utilizaron diferentes concentraciones (0,5, 1,0, 1,5, 3,5 %) de un extracto acuoso de sargazo, el cual fue obtenido a partir de sargazo fresco recogido en la costa de la playa Santa Fe, al oeste de la provincia La Habana, de acuerdo a la siguiente metodología: lavado primero del sargazo con agua de mar y luego, varias veces con agua corriente hasta eliminar toda la sal y arena. Posteriormente, el sargazo lavado se colocó en un recipiente y se cubrió completamente con agua corriente y se dejó en reposo por tres meses, con agitación dos veces por semana (1515. La Huertina De Toni - ¿Tienes una semilla? Siembrala [Internet]. [cited 15/12/2021]. Available from: https://www.lahuertinadetoni.es/ ). La especie de sargazo utilizada fue Sargassum fluitans. Al final del período, el líquido se filtró para eliminar los restos y este fue considerado un extracto al 100 %.

Los datos obtenidos, en ambos experimentos, se procesaron mediante el cálculo de las medias, la desviación estándar y los intervalos de confianza a α=0,05.

Resultados y discusión

 

La influencia del Pectimorf® en la germinación de semillas de arroz cv. INCA LP-7 se muestra en la Tabla 1. Como se puede apreciar, las concentraciones utilizadas, de forma general, no ejercieron influencia significativa en los indicadores evaluados cuando el medio de germinación fue agua destilada; sin embargo, en medio salino (100 mmol L-1 de NaCl) la concentración de 40 mg L-1 de Pm (Pectimorf) resultó la mejor, ya que influyó significativamente en el índice de germinación y en el porcentaje final de germinación, lo que repercutió en el índice de vigor de las plántulas. No obstante, la concentración de 10 mg L-1 favoreció también el porcentaje final de germinación y el índice de vigor de las plántulas. Estos resultados preliminares demostraron la factibilidad del uso del Pectimorf® para favorecer la germinación de las semillas de este cultivar en medio salino, aspecto que debe confirmarse posteriormente.

Tabla 1.  Influencia del Pectimorf® en la germinación de semillas de arroz cv. INCA LP-7.
Concentraciones de Pectimorf Medio de germinación Índice de germinación (GI) Porcentaje final de germinación (G %) Tasa de germinación (GR) Índice de vigor (VI)
Control Agua destilada 20,8 ± 3,1 88,7 ± 10,9 1,3 ± 0,7 391,7 ± 57,0
10 mg L -1 20,1 ± 1,7 77,5 ± 6,3 1,8 ± 0,2 384,1 ± 50,5
20 mg L-1 22,2 ± 3,3 85,0 ± 4,0 1,6 ± 0,4 421,3 ± 19,3
40 mg L-1 23,4 ± 2,6 88,8 ± 7,3 1,6 ± 0,5 493,2 ± 45,7
0 (Control) NaCl 16,5 ± 0,9 73,8 ± 2,4 0,9 ± 0,1 246,6 ± 25,3
10 mg L-1 100 mmol L-1 19,2 ± 3,3 90,0 ± 8,0* 1,0 ± 0,1 303,6 ± 26,4*
20 mg L-1 15,6 ± 2,0 70,0 ± 10,6 1,2 ± 0,6 259,0 ± 39,4
40 mg L-1 19,5 ± 1,1* 85,0 ± 4,0* 1,1 ± 0,5 333,2 ± 37,0*

*Representa los tratamientos que difieren significativamente del tratamiento control según intervalo de confianza a α=0,05

Medias ± intervalos de confianza

Las respuestas de las plantas de arroz al estrés salino son complejas y dependen de la duración y el tipo de estrés salino, la etapa de desarrollo del arroz, la duración del día y otros factores. Generalmente, se clasifica como cultivo sensible a la sal, pero la extensión de su sensibilidad varía durante las diferentes fases de crecimiento. Se considera que es menos sensible durante la germinación y el ahijamiento activo, mientras que muestra una mayor sensibilidad durante el inicio de las fases vegetativa y reproductiva (44. Ghaffari A, Gharechahi J, Nakhoda B, Salekdeh GH. Physiology and proteome responses of two contrasting rice mutants and their wild type parent under salt stress conditions at the vegetative stage. Journal of Plant Physiology [Internet]. 2014;171(1):31-44. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0378429017307578 ).

Diversos estudios en el cultivo del arroz han demostrado que la salinidad actúa principalmente retrasando el proceso de germinación y no afecta el porcentaje final de germinación de las semillas (1616. Fogliatto S, Serra F, Patrucco L, Milan M, Vidotto F. Effect of different water salinity levels on the germination of imazamox-resistant and sensitive weedy rice and cultivated rice. Agronomy [Internet]. 2019;9(10):658. Available from: https://www.mdpi.com/2073-4395/9/10/658 ). Sin embargo, otras investigaciones revelaron que el estrés salino (NaCl 0-300 mM) reduce el porcentaje, el índice y la velocidad de germinación, el porcentaje de energía de germinación y el tiempo medio de germinación (1717. Rahman A, Nahar K, Al Mahmud J, Hasanuzzaman M, Hossain MS, Fujita M. Salt stress tolerance in rice: Emerging role of exogenous phytoprotectants. Advances in international rice research [Internet]. 2017;139-74. Available from: https://books.google.es/books?hl=es&lr=&id=0PiODwAAQBAJ&oi=fnd&pg=PA139&dq=Salt+stress+tolerance+in+rice:+emerging+role+of+exogenous+phytoprotectants&ots=tqUevxK4Fc&sig=GXWjIks1369BxRklcb0pLoAB2KM#v=onepage&q=Salt%20stress%20tolerance%20in%20rice%3A%20emerging%20role%20of%20exogenous%20phytoprotectants&f=false ). Estos resultados podrían deberse a las altas concentraciones de sal utilizadas en el estudio.

En la Figura 1 se muestra la influencia del Pm y la afectación que la salinidad provoca en la masa seca de plántulas de arroz cv. INCA LP-7. Se puede observar que el tratamiento a las semillas con 40 mg L-1 incrementó significativamente la masa seca cuando las semillas fueron germinadas en agua. Por otra parte, ninguno de los tratamientos empleados estimuló la masa seca de las plántulas cuando estas germinaron en condiciones salinas.

Figura 1.  Efecto de diferentes concentraciones de Pectimorf® en la masa seca de plántulas de arroz cv. INCA LP-7 germinadas durante siete días, tanto en agua como en 100 mM de NaCl.

Diversas investigaciones se han ejecutado para determinar la influencia de los bioestimulantes en la protección de las plantas contra diferentes tipos de estrés. Por ejemplo, semillas de arroz cultivar INCA LP-5 fueron tratadas durante 24 horas, con diferentes concentraciones de quitosana (0, 100 y 500 mg L-1). Las semillas germinadas se transfirieron a potes, a los que se les adicionó solución nutritiva Hoagland diluida, suplementada o no con NaCl 100 mmol L-1 y se colocaron en un cuarto de crecimiento con condiciones controladas, once días después el tratamiento a las semillas con la concentración de 100 mg L-1 de quitosana estimuló la longitud y la masa seca de la parte aérea de las plántulas crecidas en medio salino (1818. Martínez González L, Reyes Guerrero Y, Falcón Rodríguez A, Núñez Vázquez M. Efecto del tratamiento a las semillas con quitosana en el crecimiento de plántulas de arroz (Oryza sativa L.) cultivar INCA LP5 en medio salino. Cultivos Tropicales [Internet]. 2015;36(1):143-50. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0258-59362015000100020 ).

Por otra parte, se ha informado que la aspersión foliar con 24-epibrasinólida (2 μmol L-1) estimuló la longitud y la masa seca de plántulas de arroz en condiciones salinas (1919. Reyes Y, Martínez L, González MC, Deyholos M, Núñez M. Efecto de la 24-epibrasinólida en el crecimiento y la fotosíntesis de plantas jóvenes de arroz tratadas con NaCl. Cultivos Tropicales [Internet]. 2017;38(3):44-54. Available from: http://scielo.sld.cu/pdf/ctr/v38n3/ctr06317.pdf ).

Diferentes concentraciones (0, 10 y 20 mg L-1) de Pm fueron aplicadas tanto por tratamiento a las semillas de arroz cv. INCA LP-7, durante 24 horas, como por adición a la solución nutritiva Hoagland suplementada con NaCl 100 mmol L-1, una vez germinadas las semillas. El tratamiento salino por trece días solo disminuyó significativamente la longitud de las raíces y del vástago de las plántulas, siendo revertida total y parcialmente dicha inhibición, respectivamente por el tratamiento a las semillas con 20 mg L-1 (88. Núñez-Vázquez M, Martínez-González L, Reyes-Guerrero Y. Oligogalacturónidos estimulan el crecimiento de plántulas de arroz cultivadas en medio salino. Cultivos Tropicales [Internet]. 2018;39(2):96-100. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S025859362018000200013&script=sci_arttext&tlng=en ).

Se debe tener en cuenta, que la respuesta del cultivo a los bioestimulantes tanto en condiciones normales como en condiciones de estrés, depende de varios factores, entre los que se encuentra, la intensidad, la duración y el momento de implantación del estrés, así como la sensibilidad del genotipo a dicho estrés. Así, en este trabajo las semillas germinaron en medio salino durante siete días; sin embargo, en los trabajos anteriores las semillas germinaron en agua y después de 48 horas se sometieron al estrés salino. Además, se utilizaron diferentes cultivares como por ejemplo, el cv. J-104 que es sensible a la salinidad y el cv. Ginés que es considerado tolerante a la sal, al igual que el cv. INCA LP-7, que fue el utilizado en este trabajo. El comportamiento de los cultivares es diferente según su tolerancia a la sal. Todo esto pudiera explicar la no respuesta encontrada en el presente trabajo al tratamiento a las semillas con Pm en la masa seca ocurriendo lo contrario en los otros trabajos donde se observó una estimulación de las plántulas en medio salino.

El efecto del Pectimorf en la estimulación del porcentaje final de germinación pudiera deberse a su efecto hormonal. En publicaciones anteriores se discute el efecto hormonal de las mezclas de oligogalacturónidos, principalmente su posible efecto auxínico (99. Falcón Rodríguez AB, Costales Mené D, González-Peña Fundora D, Nápoles García MC. Nuevos productos naturales para la agricultura: las oligosacarinas. Cultivos Tropicales [Internet]. 2015;36:111-29. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0258-59362015000500010 ). En particular, el Pectimorf se ha utilizado como sustituto de reguladores de crecimiento tradicionales en el cultivo in vitro (2020. Suárez Guerra L, Hernández Espinosa MM. Efecto del Pectimorf® en el cultivo de ápices de plantas in vitro de yuca (Manihot esculenta Crantz), clones CMC-40 y Señorita. Cultivos Tropicales [Internet]. 2015;36(4):55-62. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S025859362015000400007&script=sci_arttext&tlng=en -2222. Pino AS, García YB, Trujillo MM, Torres JL, Pérez MB, Sánchez YG, et al. Efecto del Pectimorf® como biorregulador del crecimiento en la micropropagación del cultivar ‘INIVIT MX-2008’ (Xanthosoma sagittifolium (L.) Schott). Agricultura Tropical [Internet]. 2017;3(1). Available from: http://ojs.inivit.cu/index.php?journal=inivit&page=article&op=viewFile&path[]=66&path[]=AT03012017_6BV-020 ). No obstante, se hace necesario profundizar en los mecanismos por los cuales este bioestimulante realiza su acción antiestrés.

En la Tabla 2 se muestran los resultados de la influencia del extracto acuoso de Sargassum fluitans en la germinación de semillas de arroz cv. INCA LP-7. Cuando el medio de germinación fue agua destilada la concentración de 1,5 % mostró diferencias significativas con respecto al tratamiento control en el porcentaje final de germinación, mientras que el índice de vigor aumentó con las tres concentraciones más altas del extracto. Las semillas germinadas en NaCl 100 mmol L-1 incrementaron el índice de vigor con todas las concentraciones de sargazo utilizadas y solo la concentración de 1 % estimuló significativamente el índice de germinación.

Tabla 2.  Influencia de un extracto acuoso de Sargassum fluitans en la germinación de semillas de arroz cv. INCA LP-7.
Concentraciones de extractos de Sargassum Medio de germinación Índice de germinación (GI) Porcentaje final de germinación (G %) Tasa de germinación (GR) Índice de vigor (VI)
0 (Control) Agua destilada 27,4 ± 1,8 91,3 ± 2,4 1,6 ± 0,2 444,0 ± 11,2
0,5 % 27,4 ± 3,6 92,5 ± 9,4 1,6 ± 0,2 483,0 ± 67,8
1 % 28,4 ± 2,7 96,3 ± 4,7 1,9 ± 0,2 434,7 ± 50,4
1,5 % 26,5 ± 2,0 95,0 ± 0,0* 1,9 ± 0,1 574,8 ± 27,0*
3,5 % 27,1 ± 2,0 95,0 ± 4,0 1,9 ± 0,1 523,4 ± 40,0*
5 % 24,7 ± 1,0 93,8 ± 2,4 1,7 ± 0,2 523,9 ± 29,7*
0 (Control) NaCl 18,5 ± 0,3 91,3 ± 4,7 1,1 ± 0,2 215,8 ± 30,8
0,5 % 100 mmol L-1 17,8 ± 2,6 86,3 ± 6,2 1,1 ± 0,1 291,0 ± 17,9*
1 % 21,6 ± 0,6* 92,5 ± 2,8 0,9 ± 0,1 320,3 ± 41,6*
1,5 % 20,6 ± 1,8 93,8 ± 6,52 0,9 ± 0,1 315,3 ± 48,1*
3,5 % 19,4 ± 2,7 95,0 ± 6,9 1,1 ± 0,2 309,0 ± 54,2*
5 % 19,8 ± 2,5 92,5 ± 2,8 1,3 ± 0,3 295,5 ± 9,0*

*Representa los tratamientos que difieren significativamente del tratamiento control según intervalo de confianza a α=0,05

Medias ± intervalos de confianza

La Figura 2 muestra el efecto de diferentes concentraciones de un extracto acuoso de Sargassum fluitans en la masa seca de plántulas a los siete días de haber colocado las semillas tanto en agua como en 100 mM de NaCl, para su germinación. En la misma, se aprecia que las concentraciones más altas incrementaron significativamente la masa seca cuando las plántulas crecieron en agua destilada y en medio salino, todas las concentraciones de Sargassum fluitans empleadas superaron al tratamiento control, lo que demostró la efectividad de este extracto para estimular la masa seca y por ende, el índice de vigor de las plántulas bajo estas condiciones.

Figura 2.  Efecto de diferentes concentraciones de un extracto acuoso de Sargassum fluitans en la masa seca de plántulas de arroz cv. INCA LP-7 germinadas durante siete días tanto en agua como en 100 mM de NaCl.

En estudios anteriores, se ha observado la eficiencia del extracto líquido de Sargassum tenerrimum en la germinación, crecimiento, rendimiento y calidad de semillas de Solanum lycopersicum, aplicado a la planta en tres formas diferentes, como tratamiento del suelo, aspersión foliar y tratamiento de semillas con diferentes concentraciones que oscilan entre 0,2 % y 1 % (2323. Sasikala M, Indumathi E, Radhika S, Sasireka R. Effect of seaweed extract (Sargassum tenerrimum) on seed germination and growth of tomato plant. International Journal of ChemTech Research [Internet]. 2016;9(09):285-93. Available from: https://www.researchgate.net/profile/Sasireka-Rajendran3/publication/310614544_Effect_of_seaweed_extract_Sargassum_tenerrimum_on_seed_germination_and_growth_of_tomato_plant_Solanum_lycopersicum/links/5c0f76fe92851c39ebe46f77/Effect-ofseaweed-extract-Sargassum-tenerrimum-on-seed-germination-and-growth-of-tomato-plant-Solanumlycopersicum.pdf ).

La aplicación de extractos líquidos de Sargassum wightii ha aumentado el porcentaje de germinación de semillas y el crecimiento de Triticum aestivum (1313. Fatimah S, Aliman H, Daud N. Phytochemical screening of Sargassum sp and in vitro seed germination test. Indonesian Journal of Science and Technology [Internet]. 2019;4(1):48-54. Available from: https://pdfs.semanticscholar.org/953b/0ebe37e581af32a1df44b0e0a26812dc862b.pdf ). En otra investigación realizada se demostró que los extractos acuosos al 1 % de S. wightii promovieron el crecimiento y el rendimiento de las plantas de Capsicum annum (1313. Fatimah S, Aliman H, Daud N. Phytochemical screening of Sargassum sp and in vitro seed germination test. Indonesian Journal of Science and Technology [Internet]. 2019;4(1):48-54. Available from: https://pdfs.semanticscholar.org/953b/0ebe37e581af32a1df44b0e0a26812dc862b.pdf ). Semillas de Vigna mungo L. tratadas con extractos de algas Turbinaria conoides al 1,5 % y Sargassum wightii al 1,0 %, durante tres horas, mejoraron significativamente la germinación de las semillas, la velocidad de germinación, la producción de materia seca y el índice de vigor (2424. Nguyen Q, Sundareswaran S. Effect of seed priming with seaweed extracts on Seed quality parameters in Blackgram (Vigna mungo L.) Cv. CO 6 [Internet]. Chemi Journal. Available from: https://www.chemijournal.com/archives/?year=2019&vol=7&issue=3&ArticleId=5612&si=false ).

En cuanto al estrés salino, se ha demostrado que extractos de Sargassum vulgare al 0,2 % y 0,5 % incrementaron la germinación y el crecimiento de plántulas de trigo duro (Triticum durum L.) sometidas a concentraciones de NaCl de 2 y 4 g L-1. Mientras que concentraciones superiores de estos extractos 25 y 50 % tuvieron efectos inhibitorios (2525. Latique S, Elouaer MA, Chernane H, Hannachi C, Elkaoua M. Effect of seaweed liquid extract of Sargassum vulgare on growth of durum wheat seedlings (Triticum durum L) under salt stress. International Journal of Innovation and Applied Studies [Internet]. 2014;7(4):1430. Available from: https://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/download?doi=10.1.1.674.8148&rep=rep1&type=pdf ).

Igualmente, extractos de Sargassum vulgare estimularon la germinación y el crecimiento de plantas de dos cultivares en tomate crecidas en medio salino (2626. Aymen EM, Salma L, Halima C, Cherif H, Mimoun E. Effect of seaweed extract of Sargassum vulgare on germination behavior of two tomatoes cultivars (Solanum lycopersicum L) under salt stress. Octa Journal of Environmental Research [Internet]. 2014;2(3). Available from: http://sciencebeingjournal.com/sites/default/files/02-0203_0.pdf ).

De forma similar, extractos de algas pardas (Sargassum muticum) y rojas (Jania rubens) a la concentración de 1 % disminuyeron los efectos adversos del estrés salino en el crecimiento de plantas de garbanzo (Cicer arietinum). Estos resultados estuvieron asociados a un aumento de los pigmentos fotosintéticos, una disminución de los iones Na+, aumento de los iones K+ y a una disminución del estrés oxidativo (2727. Latef AAHA, Srivastava AK, Saber H, Alwaleed EA, Tran L-SP. Sargassum muticum and Jania rubens regulate amino acid metabolism to improve growth and alleviate salinity in chickpea. Scientific reports [Internet]. 2017;7(1):1-12. Available from: https://www.nature.com/articles/s41598-017-07692-w ).

Los efectos mostrados por los extractos de sargazo pudieran deberse a la gran cantidad de compuestos activos que poseen estas algas como: fitohormonas, minerales, aminoácidos y vitaminas. Aunque es de suponer que a las concentraciones utilizadas en este trabajo, el efecto predominante sea el hormonal. En las algas pardas como el sargazo, se ha descrito la presencia de hormonas, como auxinas y citoquininas, además de otros compuestos que pueden tener acción hormonal como poliaminas, betaínas y esteroles (2828. Battacharyya D, Babgohari MZ, Rathor P, Prithiviraj B. Seaweed extracts as biostimulants in horticulture. Scientia Horticulturae [Internet]. 2015;196:39-48. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S030442381530176X ).

Conclusiones

 
  • Al analizar los resultados obtenidos en ambos experimentos, se puede concluir que el tratamiento de las semillas de arroz cv. INCA LP-7 con Pectimorf® 10 y 40 mg L-1, durante 24 horas, fue capaz de revertir la reducción que la salinidad provocó en el porcentaje final de germinación de las semillas y de incrementar significativamente el vigor de las plántulas a los siete días. Por otra parte, el tratamiento con extracto acuoso de Sargassum fluitans no estimuló el porcentaje final de germinación en medio salino; sin embargo, todas las concentraciones empleadas incrementaron significativamente la masa seca y el índice de vigor de las plántulas.

  • Estos resultados son prometedores y, por ende, se hace necesaria su confirmación posterior, así como determinar los efectos que estos tratamientos ejercen en el crecimiento y rendimiento de las plantas, con vistas a poder recomendarlos, en un futuro, para su uso en áreas arroceras afectadas por la salinidad.

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Cultivos Tropicales Vol. 43, No. 2, abril-junio 2022, ISSN: 1819-4087
 
Original article

Biostimulants promote rice (Oryza sativa L.) seed germination in saline medium

 

iDGeydi Pérez-Domínguez*✉:geydi@inca.edu.cu

iDIndira López-Padrón

iDLisbel Martínez-González

iDYanelis Reyes-Guerrero

iDMiriam de la C. Núñez-Vázquez


Instituto Nacional de Ciencias Agrícolas (INCA), carretera San José-Tapaste, km 3½, Gaveta Postal 1, San José de las Lajas, Mayabeque, Cuba. CP 32 700.

 

*Author for correspondence: geydi@inca.edu.cu

Abstract

Rice is one of the most important cereals and feeds more than 50 % of the world population. Its production is affected by different factors, among them, soil salinization. For this reason, it is necessary to use strategies to reduce the damage caused by salinity in the establishment, growth and development of these plants, one of them being the use of environmentally friendly bioactive products. The aim of this study was to determine if the treatment of rice seeds cultivar INCA LP-7 with Pectimorf® or with an aqueous extract of Sargassum fluitans is capable of stimulating their germination in a saline medium. In the first, seeds were immersed for 24 hours in solutions of different concentrations of Pectimorf® (10, 20 and 40 mg L-1) and in the second, in different concentrations of sargassum extract (0.5, 1, 1.5, 3.5 and 5 %). In both experiments, seeds were germinated for seven days and the germination dynamics, as well as the final germination percentage, seedling dry mass and vigor index were evaluated. The results showed that the application of 10 and 40 mg L-1 of Pectimorf® significantly stimulated the final germination percentage and vigor index in saline medium, while the sargassum extract increased both dry mass and vigor index in all the concentrations studied.

Key words: 
Oryza sativa, oligogalacturonide, Sargassum fluitans, seeds, salinity

Introduction

 

Rice (Oryza sativa L.) is a monocot belonging to the Poaceae family. It is one of the most widely produced cereals worldwide and is one of the mainstays of human nutrition (11. John A, Fielding M. Rice production constraints and ‘new’challenges for South Asian smallholders: insights into de facto research priorities. Agriculture & Food Security [Internet]. 2014;3(1):1-16. Available from: https://agricultureandfoodsecurity.biomedcentral.com/articles/10.1186/2048-7010-3-18 ,22. Onyango AO. Exploring options for improving rice production to reduce hunger and poverty in Kenya. World Environment [Internet]. 2014;4(4):172-9. Available from: http://article.sapub.org/10.5923.j.env.20140404.03.html ). Its future yields are jeopardized by its high sensitivity to salt, which is expected to increase with global climate change (33. Radanielson AM, Angeles O, Li T, Ismail AM, Gaydon DS. Describing the physiological responses of different rice genotypes to salt stress using sigmoid and piecewise linear functions. Field Crops Research [Internet]. 2018;220:46-56. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0378429017307578 ). It is a salt-sensitive crop and under salt stress conditions, seed germination is affected (44. Ghaffari A, Gharechahi J, Nakhoda B, Salekdeh GH. Physiology and proteome responses of two contrasting rice mutants and their wild type parent under salt stress conditions at the vegetative stage. Journal of Plant Physiology [Internet]. 2014;171(1):31-44. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0378429017307578 ,55. Nath M, Yadav S, Sahoo RK, Passricha N, Tuteja R, Tuteja N. PDH45 transgenic rice maintain cell viability through lower accumulation of Na+, ROS and calcium homeostasis in roots under salinity stress. Journal of plant physiology [Internet]. 2016;191:1-11. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0176161715002631 ).

Salinity can affect seed germination in two ways: first, it creates an osmotic stress and then the toxicity of sodium and chloride ions is evident (66. Masondo NA, Kulkarni MG, Finnie JF, Van Staden J. Influence of biostimulants-seed-priming on Ceratotheca triloba germination and seedling growth under low temperatures, low osmotic potential and salinity stress. Ecotoxicology and environmental safety [Internet]. 2018;147:43-8. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0147651317305134 ,77. Hussain S, ZHANG J, Zhong C, ZHU L, CAO X, YU S, et al. Effects of salt stress on rice growth, development characteristics, and the regulating ways: A review. Journal of integrative agriculture [Internet]. 2017;16(11):2357-74. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2095311916616088 ). Seeds are particularly vulnerable to salinity because, at this stage, they have not yet developed the physiological mechanisms to tolerate increased salt concentrations in the medium (77. Hussain S, ZHANG J, Zhong C, ZHU L, CAO X, YU S, et al. Effects of salt stress on rice growth, development characteristics, and the regulating ways: A review. Journal of integrative agriculture [Internet]. 2017;16(11):2357-74. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2095311916616088 ).

One of the strategies that could be used to counteract the salinity effect, in addition to the use of tolerant cultivars, is the application of different environmentally friendly products such as biostimulants and growth regulators (88. Núñez-Vázquez M, Martínez-González L, Reyes-Guerrero Y. Oligogalacturónidos estimulan el crecimiento de plántulas de arroz cultivadas en medio salino. Cultivos Tropicales [Internet]. 2018;39(2):96-100. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S025859362018000200013&script=sci_arttext&tlng=en ).

The Bioactive Products group of the National Institute of Agricultural Sciences has developed a mixture of oligogalacturonides commercially known as Pectimorf®. This product can activate defense mechanisms and decrease or attenuate environmental stress in plants (99. Falcón Rodríguez AB, Costales Mené D, González-Peña Fundora D, Nápoles García MC. Nuevos productos naturales para la agricultura: las oligosacarinas. Cultivos Tropicales [Internet]. 2015;36:111-29. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0258-59362015000500010 ,1010. Acosta DL, Menéndez DC, Rodríguez AF. Los oligogalacturónidos en el crecimiento y desarrollo de las plantas. Cultivos Tropicales [Internet]. 2018;39(2):127-34. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0258-59362018000200020&script=sci_arttext&tlng=pt ); in addition, it also stimulates rooting, growth and cell differentiation of different plant species.

The use of seaweeds as biostimulants is a growing sector in several parts of the world. One of the reasons that make seaweeds good candidates for the production of plant biostimulants is the presence of a wide range of bioactive substances that can promote plant growth, including: phytohormones, macro and micronutrients, amino acids and vitamins. In addition to these compounds, seaweeds possess other unique metabolites such as sulfated polysaccharides and some polyphenols that, according to other research, improve stress resistance (1111. González-Giro Z, Batista-Corbal PL. Evaluación de la fitotoxicidad de un extracto acuoso del alga Padina gymnospora (Kützing) sobre semillas de Lactuca sativa L. Biotecnología Vegetal [Internet]. 2018;18(3). Available from: https://revista.ibp.co.cu/index.php/BV/article/view/592 ).

Among all marine algae, brown algae extracts and, in particular, sargassum extracts have gained special importance, being used as biofertilizers or natural stimulants for plant growth. Several previous studies have shown the stimulating effects of these extracts on seed germination (1212. Mahmoud SH, Salama DM, El-Tanahy AM, Abd El-Samad EH. Utilization of seaweed (Sargassum vulgare) extract to enhance growth, yield and nutritional quality of red radish plants. Annals of Agricultural Sciences [Internet]. 2019;64(2):167-75. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0570178319300272 ,1313. Fatimah S, Aliman H, Daud N. Phytochemical screening of Sargassum sp and in vitro seed germination test. Indonesian Journal of Science and Technology [Internet]. 2019;4(1):48-54. Available from: https://pdfs.semanticscholar.org/953b/0ebe37e581af32a1df44b0e0a26812dc862b.pdf ).

Therefore, the aim of this work was to determine whether the treatment of rice seeds cultivar INCA LP-7 with Pectimorf® or with an aqueous extract of Sargassum fluitans is capable of stimulating seed germination in a saline medium.

Materials and methods

 

In order to fulfill the aim of this work, two experiments were carried out at the Department of Plant Physiology and Biochemistry of the National Institute of Agricultural Sciences, located in San José de las Lajas municipality, Mayabeque province.

In both experiments, rice seeds (Oryza sativa L.) cultivar INCA LP-7 were used, which were imbibed for 24 hours in different concentrations of biostimulants. Once imbibition was completed, seeds were placed in Petri dishes (20 seeds per dish and four dishes per treatment) and divided into two groups. To one group 15 mL of distilled water was added, while to the second group an equal amount of NaCl solution 100 mmol L-1 was added. The plates were placed in the dark in a growth chamber at 28-30 ºC for seven days. The number of germinated seeds was counted on each plate at 24, 48, 72, 96 and 168 hours; seeds were considered germinated when their radicle emerged. At the end of the experiment, that is, after seven days, five samples of five seedlings per treatment were taken to determine the dry mass of the seedlings, for this purpose the seedlings were placed in an oven at 70 ºC until constant mass. With the data obtained, the following indicators were calculated: germination index and rate, final germination percentage, as well as vigor index, for which the following equations were used:

Germination Index

( G I )   =   Σ   ( G t / T t )
 

where:

Gt is the number of seeds germinated at day.

t and Tt is the number of days since the beginning of the germination test.

Germination rate

( G R )   =   Σ N i   /   Σ T i   N i
 

where:

Ni is the number of newly germinated seeds at time Ti.

Final germination percentage

( G   % )   =   ( G f / N )   100
 

where:

Gf is the total number of germinated seeds at the end of the test.

N is the total number of seeds used in the test.

Vigor index

( V I )   =   S D W   G   %
 

where:

SDW is the seedling dry mass at the end of the test.

G % is the final germination percentage (1414. Moeinzadeh A, Sharif-Zadeh F, Ahmadzadeh M, Tajabadi Fh. Biopriming of Sunflower (Helianthus annuus L.) Seed with Pseudomonas fluorescens for Improvement of Seed Invigoration and Seedling Growth. Australian Journal of Crop Science [Internet]. 2010;4(7):564-70. Available from: https://search.informit.org/doi/abs/10.3316/informit.536835516534021 ).

In the first experiment, various concentrations (10, 20 and 40 mg L-1) of the oligogalacturonide mixture, known as Pectimorf® (Pm), obtained at INCA, were used. In the second one, different concentrations (0.5, 1.0, 1.5, 3.5 %) of an aqueous extract of sargassum were used, which was obtained from fresh sargassum collected on the coast of Santa Fe beach, west of Havana province, according to the following methodology: first washing the sargassum with sea water and then several times with running water until all the salt and sand were eliminated. Subsequently, the washed sargassum was placed in a container and completely covered with running water and left to rest for three months, with agitation twice a week (1515. La Huertina De Toni - ¿Tienes una semilla? Siembrala [Internet]. [cited 15/12/2021]. Available from: https://www.lahuertinadetoni.es/ ). Sargassum species used was Sargassum fluitans. At the end of the period, the liquid was filtered to eliminate the remains and this was considered a 100 % extract.

The data obtained, in both experiments, were processed by calculating means, standard deviation and confidence intervals at α=0.05.

Results and discussion

 

The influence of Pectimorph® on seed germination of rice cv. INCA LP-7 is shown in Table 1. As can be seen, the concentrations used, in general, did not exert significant influence on the indicators evaluated when the germination medium was distilled water; however, in saline medium (100 mmol L-1 of NaCl) the concentration of 40 mg L-1 of Pm (Pectimorf) was the best, since it significantly influenced the germination index and the final germination percentage, which had an impact on the vigor index of the seedlings. However, the concentration of 10 mg L-1 also favored the final germination percentage and seedling vigor index. These preliminary results demonstrated the feasibility of using Pectimorf® to favor seed germination of this cultivar in a saline medium, an aspect that should be confirmed at a later date.

Table 1.  Influence of Pectimorph® on the germination of rice seeds cv. INCA LP-7.
Pectimorph® concentrations Germination medium Germination index (GI) Final germination percentage (G%) Germination rate (GR) Vigor index (VI)
Control Distilled water 20,8 ± 3,1 88,7 ± 10,9 1,3 ± 0,7 391,7 ± 57,0
10 mg L -1 20,1 ± 1,7 77,5 ± 6,3 1,8 ± 0,2 384,1 ± 50,5
20 mg L-1 22,2 ± 3,3 85,0 ± 4,0 1,6 ± 0,4 421,3 ± 19,3
40 mg L-1 23,4 ± 2,6 88,8 ± 7,3 1,6 ± 0,5 493,2 ± 45,7
0 (Control) NaCl 16,5 ± 0,9 73,8 ± 2,4 0,9 ± 0,1 246,6 ± 25,3
10 mg L-1 100 mmol L-1 19,2 ± 3,3 90,0 ± 8,0* 1,0 ± 0,1 303,6 ± 26,4*
20 mg L-1 15,6 ± 2,0 70,0 ± 10,6 1,2 ± 0,6 259,0 ± 39,4
40 mg L-1 19,5 ± 1,1* 85,0 ± 4,0* 1,1 ± 0,5 333,2 ± 37,0*

*Represents treatments that differ significantly from the control treatment according to confidence interval at α=0.05

Means ± confidence intervals

Rice plant responses to salt stress are complex and depend on the duration and type of salt stress, rice developmental stage, day length, and other factors. Generally, it is classified as a salt-sensitive crop, but the extent of its sensitivity varies during different growth stages. It is considered to be less sensitive during germination and active tillering, whereas it shows higher sensitivity during the onset of vegetative and reproductive stages (44. Ghaffari A, Gharechahi J, Nakhoda B, Salekdeh GH. Physiology and proteome responses of two contrasting rice mutants and their wild type parent under salt stress conditions at the vegetative stage. Journal of Plant Physiology [Internet]. 2014;171(1):31-44. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0378429017307578 ).

Several studies in rice cultivation have shown that salinity acts mainly by delaying the germination process and does not affect the final percentage of seed germination (1616. Fogliatto S, Serra F, Patrucco L, Milan M, Vidotto F. Effect of different water salinity levels on the germination of imazamox-resistant and sensitive weedy rice and cultivated rice. Agronomy [Internet]. 2019;9(10):658. Available from: https://www.mdpi.com/2073-4395/9/10/658 ). However, other research revealed that salt stress (NaCl 0-300 mM) reduces germination percentage, germination rate and speed, germination energy percentage, and mean germination time (1717. Rahman A, Nahar K, Al Mahmud J, Hasanuzzaman M, Hossain MS, Fujita M. Salt stress tolerance in rice: Emerging role of exogenous phytoprotectants. Advances in international rice research [Internet]. 2017;139-74. Available from: https://books.google.es/books?hl=es&lr=&id=0PiODwAAQBAJ&oi=fnd&pg=PA139&dq=Salt+stress+tolerance+in+rice:+emerging+role+of+exogenous+phytoprotectants&ots=tqUevxK4Fc&sig=GXWjIks1369BxRklcb0pLoAB2KM#v=onepage&q=Salt%20stress%20tolerance%20in%20rice%3A%20emerging%20role%20of%20exogenous%20phytoprotectants&f=false ). These results could be due to the high salt concentrations used in the study.

Figure 1 shows the influence of Pm and the affectation that salinity causes on the dry mass of rice seedlings cv. INCA LP-7. It can be observed that the seed treatment with 40 mg L-1 significantly increased the dry mass when the seeds were germinated in water. On the other hand, none of the treatments employed stimulated seedling dry mass when seedlings were germinated under saline conditions.

Figure 1.  Effect of different concentrations of Pectimorf® on the dry mass of rice seedlings cv. INCA LP-7 germinated for seven days, both in water and in 100 mM NaCl.

Several investigations have been carried out to determine the influence of biostimulants in the protection of plants against different types of stress. For example, seeds of rice cultivar INCA LP-5 were treated for 24 hours with different concentrations of chitosan (0, 100 and 500 mg L-1). The germinated seeds were transferred to pots, to which diluted Hoagland nutrient solution was added, supplemented or not with NaCl 100 mmol L-1 and placed in a growth room with controlled conditions, eleven days later the treatment to seeds with the concentration of 100 mg L-1 of chitosan stimulated the length and dry mass of the aerial part of the seedlings grown in saline medium (1818. Martínez González L, Reyes Guerrero Y, Falcón Rodríguez A, Núñez Vázquez M. Efecto del tratamiento a las semillas con quitosana en el crecimiento de plántulas de arroz (Oryza sativa L.) cultivar INCA LP5 en medio salino. Cultivos Tropicales [Internet]. 2015;36(1):143-50. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0258-59362015000100020 ).

On the other hand, it has been reported that foliar spray with 24-epibrasinolide (2 μmol L-1) stimulated the length and dry mass of rice seedlings under saline conditions (1919. Reyes Y, Martínez L, González MC, Deyholos M, Núñez M. Efecto de la 24-epibrasinólida en el crecimiento y la fotosíntesis de plantas jóvenes de arroz tratadas con NaCl. Cultivos Tropicales [Internet]. 2017;38(3):44-54. Available from: http://scielo.sld.cu/pdf/ctr/v38n3/ctr06317.pdf ).

Different concentrations (0, 10, and 20 mg L-1) of Pm were applied both per treatment to rice seeds cv. INCA LP-7, for 24 hours, as well as by addition to the Hoagland nutrient solution supplemented with NaCl 100 mmol L-1, once seeds had germinated. The saline treatment for thirteen days only significantly decreased the length of the roots and the stem of seedlings, being totally and partially reverted this inhibition, respectively, by the treatment to seeds with 20 mg L-1 (88. Núñez-Vázquez M, Martínez-González L, Reyes-Guerrero Y. Oligogalacturónidos estimulan el crecimiento de plántulas de arroz cultivadas en medio salino. Cultivos Tropicales [Internet]. 2018;39(2):96-100. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S025859362018000200013&script=sci_arttext&tlng=en ).

It should be taken into account that the response of the crop to biostimulants, both under normal and stress conditions, depends on several factors, among which are the intensity, duration and moment of stress implantation, as well as the sensitivity of the genotype to such stress. Thus, in this work, seeds were germinated in saline medium for seven days; however, in the previous work, seeds were germinated in water and after 48 hours were subjected to salt stress. In addition, different cultivars were used, such as cv. J-104, which is sensitive to salinity, and cv. Ginés, which is considered tolerant to salt, as well as cv. INCA LP-7, which was used in this work. The behavior of the cultivars is different according to their salt tolerance. All this could explain the non-response found in the present work to the treatment of the seeds with Pm in the dry mass, the opposite occurring in the other works where a stimulation of the seedlings in a saline medium was observed. Pectimorf effect in stimulating the final germination percentage could be due to its hormonal effect. Previous publications have discussed the hormonal effect of oligogalacturonide mixtures, mainly their possible auxinic effect (99. Falcón Rodríguez AB, Costales Mené D, González-Peña Fundora D, Nápoles García MC. Nuevos productos naturales para la agricultura: las oligosacarinas. Cultivos Tropicales [Internet]. 2015;36:111-29. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0258-59362015000500010 ). In particular, Pectimorf has been used as a substitute for traditional growth regulators in in vitro culture (2020. Suárez Guerra L, Hernández Espinosa MM. Efecto del Pectimorf® en el cultivo de ápices de plantas in vitro de yuca (Manihot esculenta Crantz), clones CMC-40 y Señorita. Cultivos Tropicales [Internet]. 2015;36(4):55-62. Available from: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S025859362015000400007&script=sci_arttext&tlng=en -2222. Pino AS, García YB, Trujillo MM, Torres JL, Pérez MB, Sánchez YG, et al. Efecto del Pectimorf® como biorregulador del crecimiento en la micropropagación del cultivar ‘INIVIT MX-2008’ (Xanthosoma sagittifolium (L.) Schott). Agricultura Tropical [Internet]. 2017;3(1). Available from: http://ojs.inivit.cu/index.php?journal=inivit&page=article&op=viewFile&path[]=66&path[]=AT03012017_6BV-020 ). However, it is necessary to further investigate the mechanisms by which this biostimulant performs its anti-stress action.

Table 2 shows the results of the influence of aqueous extract of Sargassum fluitans on the germination of rice seeds cv. INCA LP-7. When the germination medium was distilled water the concentration of 1.5 % showed significant differences with respect to the control treatment in the final germination percentage, while the vigor index increased with the three highest concentrations of the extract. Seeds germinated in NaCl 100 mmol L-1 increased the vigor index with all the concentrations of sargassum used and only the 1 % concentration significantly stimulated the germination index.

Table 2.  Influence of an aqueous extract of Sargassum fluitans on the germination of rice seeds cv. INCA LP-7.
Concentrations of Sargassum extracts Germination medium Germination Index (GI) Final germination percentage (G%) Germination rate (GR) Vigor index (VI)
0 (Control) Destilled water 27,4 ± 1,8 91,3 ± 2,4 1,6 ± 0,2 444,0 ± 11,2
0,5 % 27,4 ± 3,6 92,5 ± 9,4 1,6 ± 0,2 483,0 ± 67,8
1 % 28,4 ± 2,7 96,3 ± 4,7 1,9 ± 0,2 434,7 ± 50,4
1,5 % 26,5 ± 2,0 95,0 ± 0,0* 1,9 ± 0,1 574,8 ± 27,0*
3,5 % 27,1 ± 2,0 95,0 ± 4,0 1,9 ± 0,1 523,4 ± 40,0*
5 % 24,7 ± 1,0 93,8 ± 2,4 1,7 ± 0,2 523,9 ± 29,7*
0 (Control) NaCl 18,5 ± 0,3 91,3 ± 4,7 1,1 ± 0,2 215,8 ± 30,8
0,5 % 100 mmol L-1 17,8 ± 2,6 86,3 ± 6,2 1,1 ± 0,1 291,0 ± 17,9*
1 % 21,6 ± 0,6* 92,5 ± 2,8 0,9 ± 0,1 320,3 ± 41,6*
1,5 % 20,6 ± 1,8 93,8 ± 6,52 0,9 ± 0,1 315,3 ± 48,1*
3,5 % 19,4 ± 2,7 95,0 ± 6,9 1,1 ± 0,2 309,0 ± 54,2*
5 % 19,8 ± 2,5 92,5 ± 2,8 1,3 ± 0,3 295,5 ± 9,0*

*Represents treatments that differ significantly from the control treatment according to confidence interval at α=0.05.

Means ± confidence intervals

Figure 2 shows the effect of different concentrations of an aqueous extract of Sargassum fluitans on the dry mass of seedlings seven days after placing the seeds in both water and 100 mM NaCl for germination. In the same, it is appreciated that the highest concentrations significantly increased the dry mass when the seedlings were grown in distilled water and in saline medium, all the concentrations of Sargassum fluitans used surpassed the control treatment, which demonstrated the effectiveness of this extract to stimulate the dry mass and therefore, the vigor index of seedlings under these conditions.

Figura 2.  Effect of different concentrations of an aqueous extract of Sargassum fluitans on the dry mass of rice seedlings cv. INCA LP-7 germinated for seven days in both water and 100 mM NaCl.

In previous studies, the efficiency of liquid extract of Sargassum tenerrimum on germination, growth, yield and quality of seeds of Solanum lycopersicum, applied to the plant in three different ways, as soil treatment, foliar spraying and seed treatment with different concentrations ranging from 0.2 to 1%, has been observed (2323. Sasikala M, Indumathi E, Radhika S, Sasireka R. Effect of seaweed extract (Sargassum tenerrimum) on seed germination and growth of tomato plant. International Journal of ChemTech Research [Internet]. 2016;9(09):285-93. Available from: https://www.researchgate.net/profile/Sasireka-Rajendran3/publication/310614544_Effect_of_seaweed_extract_Sargassum_tenerrimum_on_seed_germination_and_growth_of_tomato_plant_Solanum_lycopersicum/links/5c0f76fe92851c39ebe46f77/Effect-ofseaweed-extract-Sargassum-tenerrimum-on-seed-germination-and-growth-of-tomato-plant-Solanumlycopersicum.pdf ). The application of liquid extracts of Sargassum wightii has increased the percentage of seed germination and Triticum aestivum growth (1313. Fatimah S, Aliman H, Daud N. Phytochemical screening of Sargassum sp and in vitro seed germination test. Indonesian Journal of Science and Technology [Internet]. 2019;4(1):48-54. Available from: https://pdfs.semanticscholar.org/953b/0ebe37e581af32a1df44b0e0a26812dc862b.pdf ). Another investigation showed that 1 % aqueous extracts of S. wightii promoted growth and yield of Capsicum annum plants (1313. Fatimah S, Aliman H, Daud N. Phytochemical screening of Sargassum sp and in vitro seed germination test. Indonesian Journal of Science and Technology [Internet]. 2019;4(1):48-54. Available from: https://pdfs.semanticscholar.org/953b/0ebe37e581af32a1df44b0e0a26812dc862b.pdf ). Seeds of Vigna mungo L. treated with 1.5 % Turbinaria conoides and 1.0 % Sargassum wightii algae extracts for three hours significantly improved seed germination, germination speed, dry matter production and vigor index (2424. Nguyen Q, Sundareswaran S. Effect of seed priming with seaweed extracts on Seed quality parameters in Blackgram (Vigna mungo L.) Cv. CO 6 [Internet]. Chemi Journal. Available from: https://www.chemijournal.com/archives/?year=2019&vol=7&issue=3&ArticleId=5612&si=false ).

Regarding salt stress, it has been shown that 0.2 and 0.5 % extracts of Sargassum vulgare increased germination and growth of durum wheat (Triticum durum L.) seedlings subjected to NaCl concentrations of 2 and 4 g L-1. While higher concentrations of these extracts 25 and 50 % had inhibitory effects (2525. Latique S, Elouaer MA, Chernane H, Hannachi C, Elkaoua M. Effect of seaweed liquid extract of Sargassum vulgare on growth of durum wheat seedlings (Triticum durum L) under salt stress. International Journal of Innovation and Applied Studies [Internet]. 2014;7(4):1430. Available from: https://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/download?doi=10.1.1.674.8148&rep=rep1&type=pdf ).

Similarly, extracts of Sargassum vulgare stimulated germination and plant growth of two tomato cultivars grown in saline medium (2626. Aymen EM, Salma L, Halima C, Cherif H, Mimoun E. Effect of seaweed extract of Sargassum vulgare on germination behavior of two tomatoes cultivars (Solanum lycopersicum L) under salt stress. Octa Journal of Environmental Research [Internet]. 2014;2(3). Available from: http://sciencebeingjournal.com/sites/default/files/02-0203_0.pdf ).

Similarly, extracts of brown (Sargassum muticum) and red algae (Jania rubens) at a concentration of 1 % reduced the adverse effects of salt stress on the growth of chickpea (Cicer arietinum) plants. These results were associated with an increase in photosynthetic pigments, a decrease in Na+ ions, an increase in K+ ions, and a decrease in oxidative stress (2727. Latef AAHA, Srivastava AK, Saber H, Alwaleed EA, Tran L-SP. Sargassum muticum and Jania rubens regulate amino acid metabolism to improve growth and alleviate salinity in chickpea. Scientific reports [Internet]. 2017;7(1):1-12. Available from: https://www.nature.com/articles/s41598-017-07692-w ).

The effects shown by sargassum extracts could be due to the large amount of active compounds that these algae possess, such as phytohormones, minerals, amino acids, and vitamins. Although it is to be assumed that at the concentrations used in this work, the predominant effect is hormonal. In brown algae such as sargassum, the presence of hormones such as auxins and cytokinins has been described, in addition to other compounds that may have hormonal action such as polyamines, betaines and sterols (2828. Battacharyya D, Babgohari MZ, Rathor P, Prithiviraj B. Seaweed extracts as biostimulants in horticulture. Scientia Horticulturae [Internet]. 2015;196:39-48. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S030442381530176X ).

Conclusions

 
  • When analyzing the results obtained in both experiments, it can be concluded that the treatment of rice seeds cv. INCA LP-7 with Pectimorf® 10 and 40 mg L-1, for 24 hours, was able to reverse the reduction that salinity caused in the final percentage of seed germination and to significantly increase seedling vigor after seven days. On the other hand, the treatment with aqueous extract of Sargassum fluitans did not stimulate the final germination percentage in saline medium; however, all the concentrations used significantly increased the dry mass and vigor index of seedlings.

  • These results are promising and, therefore, further confirmation is necessary, as well as determining the effects of these treatments on plant growth and yield, with a view to recommending them for future use in rice-growing areas affected by salinity.