Introducción

El mango (Mangifera indica L.) es considerada una de las frutas tropicales más importantes a nivel mundial, no solo por su sabor característico y su amplia variedad de usos culinarios, sino también por su alto valor nutricional (11. Wang P, Luo Y, Huang J, Gao S, Zhu G, Dang Z, et al. The genome evolution and domestication of tropical fruit mango. Genome Biol. 2020;21(1):60. Available from: https://doi.org/10.1186/s13059-020-01959-8 ). Es una fuente abundante en vitaminas A, C y E, así como en compuestos antioxidantes y fibra, lo que ha impulsado un incremento sostenido en su demanda global (22. Lebaka VR, Wee Y-J, Ye W, Korivi M. Nutritional composition and bioactive compounds in three different parts of mango fruit. Int J Environ Res Public Health. 2021;18(2):741. Available from: https://doi.org/10.3390/ijerph18020741 ). Sin embargo, al ser una fruta climatérica, su rápida maduración genera pérdidas significativas, representando un desafío tanto para productores como para comercializadores, quienes buscan mantener la calidad del fruto desde la cosecha hasta el consumidor final (33. Galsurker O, Diskin S, Maurer D, Feygenberg O, Alkan N. Fruit stem-end rot. Horticulturae. 2018;4(4):50. Available from: https://doi.org/10.3390/horticulturae4040050 ).

Entre los principales problemas que afectan la comercialización del mango se encuentran las enfermedades por hongos, siendo la antracnosis la más relevante. Esta enfermedad, causada principalmente por hongos fitopatógenos, inicia con pequeñas manchas oscuras que se expanden rápidamente a medida que el fruto madura, afectando tanto la apariencia externa como la pulpa interna (44. Ardila CEC, Ramirez LA, Ortiz FAP. Spectral analysis for the early detection of anthracnose in fruits of Sugar Mango (Mangifera indica). Comput Electron Agric. 2020;173:105357. Available from: https://doi.org/10.1016/j.compag.2020.105357 ,55. Dofuor AK, Quartey NK-A, Osabutey AF, Antwi-Agyakwa AK, Asante K, Boateng BO, et al. Mango anthracnose disease: the current situation and direction for future research. Front Microbiol. 2023;14:1168203. Available from: https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1168203 ). Las pérdidas económicas asociadas son considerables, especialmente en el periodo postcosecha, cuando factores como la humedad y la temperatura favorecen la proliferación del patógeno (66. Zakaria L. Diversity of Colletotrichum species associated with anthracnose disease in tropical fruit crops: A review. Agriculture. 2021;11(4):297. Available from: https://doi.org/10.3390/agriculture11040297 ).

Históricamente, el control de la antracnosis ha dependido casi exclusivamente de fungicidas sintéticos (77. Nandeesha C V, Akbari LF, Jaiswal A, Harsha BR, Patil B, Bhaliya CM, et al. Control efficacy and yield response of different fungicides evaluated against anthracnose of green gram. Crop Prot. 2023;174:106432. Available from: https://doi.org/10.1016/j.cropro.2023.106432 ). Aunque efectivos a corto plazo, su aplicación intensiva ha provocado la aparición de cepas resistentes, impactos negativos sobre el medio ambiente y la presencia de residuos químicos en los frutos (88. Boersma SJ, Depuydt DJ, Vyn RJ, Gillard CL. Fungicide efficacy for control of anthracnose of dry bean in Ontario. Crop Prot. 2020;127:104979. Available from: https://doi.org/10.1016/j.cropro.2019.104979 ). En la actualidad, las normativas internacionales de seguridad alimentaria son cada vez más estrictas, limitando el acceso a mercados premium para productos que exceden los límites máximos de residuos (99. Lengai GMW, Fulano AM, Muthomi JW. Improving access to export market for fresh vegetables through reduction of phytosanitary and pesticide residue constraints. Sustainability. 2022;14(13):8183. Available from: https://doi.org/10.3390/su14138183 ).

Frente a esta situación, el control biológico ha surgido como una alternativa eficiente y sostenible, esta estrategia utiliza microorganismos benéficos capaces de reducir la población de patógenos y proteger al fruto sin afectar al ecosistema (1010. Rodríguez JHV, Sarango Y, Aveiga M del RV, Mata JDO, Sevilla-Carrasco JD, Cuesta JMD, et al. Effect of herbicides on the growth of beneficial microorganisms in rhizospheric soil. Revista La Facultad de Agronomía La Univ Del Zulia. 2025;42(2). Available from: https://doi.org/10.47280/RevFacAgron(LUZ).v42.n2.VI ). Entre los microorganismos más estudiados para el biocontrol, se encuentra Trichoderma harzianum, el cual actúa mediante micoparasitismo, competencia por nutrientes y espacio, y producción de enzimas hidrolíticas como quitinasas y glucanasas que degradan la pared celular de los hongos fitopatógenos (1111. Jeres-Caguana GA, Montaño-Roldan VL, Ordoñez-Zuñiga NL, Vera-Rodriguez JH, Lucas-Vidal LR. Efecto biorremediador de la espirulina y Trichoderma spp. en suelo contaminado con plomo (Pb). Multidiscip Collab J. 2025;3(2):1-12. Available from: https://doi.org/10.70881/mcj/v3/n2/48 ). Tiene la capacidad de adaptarse a distintos ambientes y crecer rápido lo que lo hace un buen candidato para el control de antracnosis en frutos (1212. Carpio M, Vera J, Yugsan F, Gavin C, Barzallo D. Biofertilizer enriched with Paenibacillus polymyxa and Trichoderma sp. for radish cultivation. Revista Caatinga. 2025;38:e13759-e13759. Available from: https://doi.org/10.1590/1983-21252025v3813759rc ).

Por otro lado, las bacterias del género Pseudomonas, especialmente Pseudomonas fluorescens, son un bacilo Gram-negativo perteneciente a la familia Pseudomonadaceae, han demostrado ser excelentes agentes de bioprotección. Estas bacterias son famosas por poder convivir en los tejidos de las plantas y producir metabolitos secundarios con función antifúngica, como los sideróforos y antibióticos (1313. Jisha MS, Linu MS, Sreekumar J. Induction of systemic resistance in chilli (Capsicum annuum L.) by Pseudomonas aeruginosa against anthracnose pathogen Colletotrichum capsici. J Trop Agric. 2018;56(2). Available from: https://jtropag.kau.in/index.php/ojs2/article/view/586 ). Además, P. fluorescens puede generar defensa sistémica en el fruto, haciendo más fuertes sus defensas normales contra la llegada de patógenos, lo cual ayuda mucho a la acción de otros elementos biológicos (1414. Lahkar J, Goswami D, Deka S, Ahmed G. Novel approaches for application of biosurfactant produced by Pseudomonas aeruginosa for biocontrol of Colletotrichum capsici responsible for anthracnose disease in chilli. Eur J plant Pathol. 2018;150(1):57-71. Available from: https://doi.org/10.1007/s10658-017-1252-3 ). El estudio se basa en evaluar el efecto de Trichoderma harzianum y Pseudomonas fluorescens en el control de la antracnosis en frutos de mango en postcosecha.

Materiales y Métodos

Resultados y Discusión

Los resultados del análisis molecular de los microorganismos empleados en este estudio, presentados en la Tabla 2, confirmaron de manera precisa la identidad de los agentes de biocontrol T. harzianum y P. fluorescens, así como del patógeno C. gloeosporioides.

La caracterización molecular confirmó la identidad de las especies de microorganismos benéficos con exactitud para P. fluorescens y T. harzianum, y un 98 % para el patógeno C. gloeosporioides. Esta exactitud es clave, pues usar fragmentos de genes como el gen 16S en bacterias e ITS en hongos es una forma de comparar la similitud genética entre estas especies de microrganismos. Según algunos autores, la correcta identificación de las especies permite predecir con mayor certeza la efectividad de los microorganismos benéficos frente a patógenos específicos, asegurando la validez de los ensayos de biocontrol (1515. Vera-Rodríguez JH, del Rocío Villamar-Aveiga M, Herrera-Feijoo RJ, Sevilla-Carrasco JD, Moreno D, Gavin-Moyano CS, et al. Detection of Diaporthe sp. in cacao plants (cv. CCN 51) in Guayas Province, Ecuador. Revista LA Fac Agron LA Univ DEL ZULIA. 2025;42(4). Available from: https://doi.org/10.47280/RevFacAgron(LUZ).v42.n4.III ).

Durante la evaluación pos cosecha, se observó la apariencia externa de los frutos al momento de la cosecha y los cambios presentados durante los primeros cuatro días, así como la condición interna de la pulpa. Estos análisis permitieron identificar la presencia de síntomas de antracnosis y evaluar la integridad del tejido en los distintos tratamientos aplicados. La apariencia de los frutos bajo las diferentes condiciones experimentales se muestra en la Figura 1.

Durante la pos cosecha, el único tratamiento que presentó afectación por antracnosis fue el T0 (Control, sin microorganismos). En varias repeticiones de este tratamiento (R1, R2, R3 y R7) se observaron lesiones necróticas marrones y negras que se extendieron desde la piel hacia la pulpa, síntomas típicos de C. gloeosporioides, los cuales podrían comprometer la calidad comercial y la vida útil de los frutos. La descripción de estas afecciones internas se ilustra en la Figura 2, donde se evidencian claramente los daños en los frutos del control.

El análisis de incidencia mostró que solo los frutos del tratamiento T0 presentaron síntomas de antracnosis, alcanzando un 10 % de incidencia, mientras que los frutos de los demás tratamientos con microorganismos benéficos no mostraron presencia de la enfermedad (Tabla 3). Estos resultados confirman la eficacia de T. harzianum y P. fluorescens para el control de hongos fitopatógenos en mango durante la pos cosecha.

En contraste, los frutos del tratamiento T0 (control) mostraron lesiones necróticas típicas de C. gloeosporioides, que se extienden desde la epidermis hacia la pulpa, reflejando la acción del patógeno, el cual permanece latente en los tejidos hasta que la fruta madura. Según Niebles (1616. Niebles JS, Escobar JP, Centeno KV, Cotrina DC, Gómez RM, Abanto RL, et al. Control de Colletotrichum “agente causal de la antracnosis en el fruto del mango (Mangifera indica L.)” aplicando metabolitos de Trichoderma. Revista Ciencias Biológicas y Ambient. 2022;1(1). Available from: https://doi.org/10.33326/29585309.2022.1.1597 ), el hongo filamentoso Trichoderma forma una capa protectora sobre el fruto y produce metabolitos antifúngicos, actuando como una barrera biológica que inhibe la reproducción de las esporas del patógeno, lo que explica la ausencia de síntomas en los frutos tratados.

Por su parte, el tratamiento con P. fluorescens mostró una notable reducción de la severidad externa e interna, actuando a través de la competencia por nutrientes y la producción de sideróforos. Incluso a concentraciones de 1×10⁷ UFC mL, la bacteria logró limitar el avance del hongo. Tal como dicen algunos investigadores, las bacterias Pseudomonas pueden hacer que el fruto tenga más resistencia sistémica, haciendo más fuertes las paredes de las células y frenando que las hifas del patógeno se extiendan hacia la pulpa (1717. Jiménez FAN, Ortiz ÁMM. Alternativas para el control de antracnosis (Colletotrichum spp) en maracuyá (Passiflora edulis). Revista Sist Prod Agroecol. 2018;9(2):2-17. Available from: https://revistas.unillanos.edu.co/index.php/sistemasagroecologicos/article/view/714 ), lo cual explica por qué los tratamientos T1 y T2 mantuvieron bien el mango por dentro durante los cuatro días después de la cosecha.

Además, se evaluó la concentración de sólidos solubles (Grados Brix) de la pulpa, evidenciando que el consorcio de P. fluorescens + T. harzianum (T5) alcanzó el valor más alto (15 °Brix), mientras que los tratamientos con cepas individuales de microorganismos también mostraron incrementos respecto al control (10 °Brix) (Tabla 4).

Este aumento de sólidos solubles sugiere que la interacción entre ambos microorganismos no solo protege al fruto frente a la antracnosis, sino que también mejora su calidad organoléptica y el metabolismo de carbohidratos, favoreciendo la conversión de almidones en azúcares simples durante la maduración. Como dice Schubert (1818. Schubert R, Werner S, Cirka H, Rödel P, Tandron Moya Y, Mock H-P, et al. Effects of arbuscular mycorrhization on fruit quality in industrialized tomato production. Int J Mol Sci. 2020;21(19):7029. Available from: https://doi.org/10.3390/ijms21197029 ), usar consorcios microbianos puede hacer que se activen procesos enzimáticos que hacen más rápida la conversión de almidones en azúcares simples, lo que podría estar mejorando el perfil comercial del mango y que se acepte más en el mercado.

Conclusiones

El empleo de los microorganismos de control biológico T. harzianum y P. fluorescens, ya sea como cepas puras individuales o su consorcio, asegura los mecanismos de defensa del árbol de mango contra la antracnosis de la especie (C. gloeosporioides), contribuyendo una protección en el fruto incluso después de la cosecha, a diferencia de las plantaciones consideradas como testigo.

El uso del consorcio microbiano (T5) T. harzianum + P. fluorescens, no solo afirma el estado de salud de las plantas a través del fruto, sino que mejora su calidad incluso de las ventas al aumentar la concentración de sólidos solubles (15 °Brix), mostrando un mayor alargue de la vida útil del fruto de mango y del cultivo.

Introduction

Mango (Mangifera indica L.) is considered one of the most important tropical fruits worldwide, not only for its characteristic flavor and wide variety of culinary uses, but also for its high nutritional value (11. Wang P, Luo Y, Huang J, Gao S, Zhu G, Dang Z, et al. The genome evolution and domestication of tropical fruit mango. Genome Biol. 2020;21(1):60. Available from: https://doi.org/10.1186/s13059-020-01959-8 ). It is an abundant source of vitamins A, C, and E, as well as antioxidant compounds and fiber, which has driven a sustained increase in its global demand (22. Lebaka VR, Wee Y-J, Ye W, Korivi M. Nutritional composition and bioactive compounds in three different parts of mango fruit. Int J Environ Res Public Health. 2021;18(2):741. Available from: https://doi.org/10.3390/ijerph18020741 ). However, as a climacteric fruit, its rapid ripening generates significant losses, representing a challenge for both producers and marketers seeking to maintain fruit quality from harvest to the final consumer (33. Galsurker O, Diskin S, Maurer D, Feygenberg O, Alkan N. Fruit stem-end rot. Horticulturae. 2018;4(4):50. Available from: https://doi.org/10.3390/horticulturae4040050 ).

Among the main problems affecting mango commercialization are fungal diseases, with anthracnose being the most relevant. This disease, caused mainly by phytopathogenic fungi, begins with small dark spots that expand rapidly as the fruit ripens, affecting both the external appearance and the internal pulp (44. Ardila CEC, Ramirez LA, Ortiz FAP. Spectral analysis for the early detection of anthracnose in fruits of Sugar Mango (Mangifera indica). Comput Electron Agric. 2020;173:105357. Available from: https://doi.org/10.1016/j.compag.2020.105357 ,55. Dofuor AK, Quartey NK-A, Osabutey AF, Antwi-Agyakwa AK, Asante K, Boateng BO, et al. Mango anthracnose disease: the current situation and direction for future research. Front Microbiol. 2023;14:1168203. Available from: https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1168203 ). The associated economic losses are considerable, especially during the postharvest period, when factors such as humidity and temperature favor pathogen proliferation (66. Zakaria L. Diversity of Colletotrichum species associated with anthracnose disease in tropical fruit crops: A review. Agriculture. 2021;11(4):297. Available from: https://doi.org/10.3390/agriculture11040297 ).

Historically, the control of anthracnose has depended almost exclusively on synthetic fungicides (77. Nandeesha C V, Akbari LF, Jaiswal A, Harsha BR, Patil B, Bhaliya CM, et al. Control efficacy and yield response of different fungicides evaluated against anthracnose of green gram. Crop Prot. 2023;174:106432. Available from: https://doi.org/10.1016/j.cropro.2023.106432 ). Although effective in the short term, their intensive application has led to the emergence of resistant strains, negative impacts on the environment, and the presence of chemical residues in the fruits (88. Boersma SJ, Depuydt DJ, Vyn RJ, Gillard CL. Fungicide efficacy for control of anthracnose of dry bean in Ontario. Crop Prot. 2020;127:104979. Available from: https://doi.org/10.1016/j.cropro.2019.104979 ). Currently, international food safety regulations are becoming increasingly strict, limiting access to premium markets for products exceeding maximum residue limits (99. Lengai GMW, Fulano AM, Muthomi JW. Improving access to export market for fresh vegetables through reduction of phytosanitary and pesticide residue constraints. Sustainability. 2022;14(13):8183. Available from: https://doi.org/10.3390/su14138183 ).

In response to this situation, biological control has emerged as an efficient and sustainable alternative. This strategy uses beneficial microorganisms capable of reducing pathogen populations and protecting the fruit without affecting the ecosystem (1010. Rodríguez JHV, Sarango Y, Aveiga M del RV, Mata JDO, Sevilla-Carrasco JD, Cuesta JMD, et al. Effect of herbicides on the growth of beneficial microorganisms in rhizospheric soil. Revista La Facultad de Agronomía La Univ Del Zulia. 2025;42(2). Available from: https://doi.org/10.47280/RevFacAgron(LUZ).v42.n2.VI ). Among the most studied microorganisms for biocontrol is Trichoderma harzianum, which acts through mycoparasitism, competition for nutrients and space, and the production of hydrolytic enzymes such as chitinases and glucanases that degrade the cell wall of phytopathogenic fungi (1111. Jeres-Caguana GA, Montaño-Roldan VL, Ordoñez-Zuñiga NL, Vera-Rodriguez JH, Lucas-Vidal LR. Efecto biorremediador de la espirulina y Trichoderma spp. en suelo contaminado con plomo (Pb). Multidiscip Collab J. 2025;3(2):1-12. Available from: https://doi.org/10.70881/mcj/v3/n2/48 ). Its ability to adapt to different environments and grow rapidly makes it a good candidate for the control of anthracnose in fruits (1212. Carpio M, Vera J, Yugsan F, Gavin C, Barzallo D. Biofertilizer enriched with Paenibacillus polymyxa and Trichoderma sp. for radish cultivation. Revista Caatinga. 2025;38:e13759-e13759. Available from: https://doi.org/10.1590/1983-21252025v3813759rc ).

On the other hand, bacteria of the genus Pseudomonas, especially Pseudomonas fluorescens (a Gram-negative bacillus belonging to the Pseudomonadaceae family), have proven to be excellent bioprotection agents. These bacteria are well known for their ability to coexist within plant tissues and produce secondary metabolites with antifungal function, such as siderophores and antibiotics (1313. Jisha MS, Linu MS, Sreekumar J. Induction of systemic resistance in chilli (Capsicum annuum L.) by Pseudomonas aeruginosa against anthracnose pathogen Colletotrichum capsici. J Trop Agric. 2018;56(2). Available from: https://jtropag.kau.in/index.php/ojs2/article/view/586 ). Furthermore, P. fluorescens can generate systemic defense in the fruit, strengthening its natural defenses against pathogen attack, which greatly aids the action of other biological agents (1414. Lahkar J, Goswami D, Deka S, Ahmed G. Novel approaches for application of biosurfactant produced by Pseudomonas aeruginosa for biocontrol of Colletotrichum capsici responsible for anthracnose disease in chilli. Eur J plant Pathol. 2018;150(1):57-71. Available from: https://doi.org/10.1007/s10658-017-1252-3 ). The study is based on evaluating the effect of Trichoderma harzianum and Pseudomonas fluorescens on the control of anthracnose in postharvest mango fruits.

Materials and Methods

Results and Discussion

The molecular analysis results (Table 2) accurately confirmed the identity of the biocontrol agents T. harzianum and P. fluorescens, along with the pathogen C. gloeosporioides.

Molecular characterization accurately confirmed the identity of the beneficial microorganism species for P. fluorescens and T. harzianum, and with 98 % certainty for the pathogen C. gloeosporioides. This accuracy is key because using gene fragments such as the 16S gene in bacteria and ITS in fungi is a way to compare the genetic similarity among these microorganism species. According to some authors, correct species identification allows for greater certainty in predicting the effectiveness of beneficial microorganisms against specific pathogens, ensuring the validity of biocontrol assays (1515. Vera-Rodríguez JH, del Rocío Villamar-Aveiga M, Herrera-Feijoo RJ, Sevilla-Carrasco JD, Moreno D, Gavin-Moyano CS, et al. Detection of Diaporthe sp. in cacao plants (cv. CCN 51) in Guayas Province, Ecuador. Revista LA Fac Agron LA Univ DEL ZULIA. 2025;42(4). Available from: https://doi.org/10.47280/RevFacAgron(LUZ).v42.n4.III ).

During postharvest evaluation, the external appearance of the fruits at harvest time and the changes observed during the first four days were recorded, as well as the internal condition of the pulp. These analyses allowed for the identification of anthracnose symptoms and the assessment of tissue integrity under the different applied treatments. The appearance of the fruits under the different experimental conditions is shown in Figure 1.

Only the control treatment (T0, without microorganisms) showed anthracnose damage during postharvest. Several replicates of this treatment (R1, R2, R3, and R7) exhibited brown and black necrotic lesions extending from the skin into the pulp, typical symptoms of C. gloeosporioides, which could compromise fruit commercial quality and shelf life. Figure 2 illustrates these internal damages.

The incidence analysis showed that only fruits from the T0 treatment (Control, without microorganisms) presented anthracnose symptoms, reaching 10 % incidence. In contrast, fruits from the other treatments with beneficial microorganisms showed no signs of the disease (Table 3). These results confirm the efficacy of T. harzianum and P. fluorescens for the control of phytopathogenic fungi in mango during postharvest.

In contrast, fruits from the control treatment (T0) showed typical necrotic lesions of C. gloeosporioides, extending from the epidermis into the pulp, reflecting the action of the pathogen, which remains latent in the tissues until fruit ripening. According to some authors (1616. Niebles JS, Escobar JP, Centeno KV, Cotrina DC, Gómez RM, Abanto RL, et al. Control de Colletotrichum “agente causal de la antracnosis en el fruto del mango (Mangifera indica L.)” aplicando metabolitos de Trichoderma. Revista Ciencias Biológicas y Ambient. 2022;1(1). Available from: https://doi.org/10.33326/29585309.2022.1.1597 ), the filamentous fungus Trichoderma forms a protective layer on the fruit surface and produces antifungal metabolites, acting as a biological barrier that inhibits the reproduction of pathogen spores, which explains the absence of symptoms in the treated fruits.

On the other hand, the treatment with P. fluorescens showed a notable reduction in external and internal severity, acting through nutrient competition and siderophore production. Even at a concentration of 1×10⁷ CFU/mL, the bacterium was able to limit fungal progression. As stated by some researchers, Pseudomonas bacteria can induce systemic resistance in the fruit, strengthening cell walls and preventing the spread of pathogen hyphae into the pulp (1717. Jiménez FAN, Ortiz ÁMM. Alternativas para el control de antracnosis (Colletotrichum spp) en maracuyá (Passiflora edulis). Revista Sist Prod Agroecol. 2018;9(2):2-17. Available from: https://revistas.unillanos.edu.co/index.php/sistemasagroecologicos/article/view/714 ), which explains why treatments T1 and T2 maintained good internal quality of the mango during the four days postharvest.

Additionally, the concentration of soluble solids (Brix degrees) in the pulp was evaluated, showing that the consortium of P. fluorescens + T. harzianum (T5) reached the highest value (15 °Brix), while treatments with individual microbial strains also showed increases compared to the control (10 °Brix) (Table 4).

This increase in soluble solids suggests that the microbial interaction not only protects the fruit from anthracnose but also enhances organoleptic quality and carbohydrate metabolism, promoting starch-to-sugar conversion during ripening. According to some researchers (1818. Schubert R, Werner S, Cirka H, Rödel P, Tandron Moya Y, Mock H-P, et al. Effects of arbuscular mycorrhization on fruit quality in industrialized tomato production. Int J Mol Sci. 2020;21(19):7029. Available from: https://doi.org/10.3390/ijms21197029 ), microbial consortia can activate enzymatic processes that accelerate this conversion, potentially improving mango's commercial profile and market acceptance.

Conclusions

The use of the biological control microorganisms T. harzianum and P. fluorescens, whether as individual pure strains or as a consortium, ensures the defense mechanisms of the mango tree against anthracnose caused by C. gloeosporioides, providing protection to the fruit even after harvest, unlike the untreated control plantations.

The use of the microbial consortium (T5) T. harzianum + P. fluorescens not only supports the health status of the plants through the fruit but also improves fruit quality for commercialization by increasing soluble solids concentration (15 °Brix), thereby extending the shelf life of both the mango fruit and the crop.